Question

右圖是將人的生長激素基因導入細菌B細胞內制造“工程菌”示意圖，所用運載體為質粒A。已知細菌B細胞內不含質粒A，也不含質粒A上的基因，質粒A導入細菌B后，其上的基因能得到表達。請回答：

 (1)一個基因表達載體的組成除目的基因外，還必須有             、             和標記基因等。將基因表達載體導入細菌B之前，一般要先用        處理細胞，以增加其細胞壁的通透性。

(2)將得到的細菌涂抹在一個含有氨芐青霉素的培養基上，能夠生長的就是導入質粒A或重組質粒的，反之則沒有。以上培養基按用途屬于             培養基。

(3)上述培養基上聚集的菌種可通過               法或             培養成單菌落，經進一步篩選即可獲得導入重組質粒的工程菌。獲得純培養物的關鍵是無菌操作，其中對培養皿進行滅菌常用的方法是                  。

(4)在獲得目的基因的過程中，PCR技術相當重要。PCR擴增反應需要在一定的緩沖溶液中加入DNA模板、分別與兩條模板鏈相結合的兩種        、四種脫氧核苷酸和          的 DNA聚合酶。

Answer 1

（1）啟動子    終止子      Ca²⁺   

（2）選擇

（3）平板劃線      稀釋涂布平板     干熱滅菌法   

（4）引物      耐高溫

解析:

（1）基因表達載體的組成包括目的基因、啟動子、終止子、標記基因，將基因表達載體導入細菌B之前，一般要先用Ca²⁺處理細胞；（2）含有氨芐青霉素的培養基能培養導入質粒A或重組質粒的細菌，而其他的則不能生長，說明屬于選擇培養基；（3）將培養基上聚集的菌種培養成單菌落的方法是平板劃線法或稀釋涂布平板法，對培養皿進行滅菌常用的方法是干熱滅菌法；（4）PCR擴增反應需要在一定的緩沖溶液中加入DNA模板、分別與兩條模板鏈相結合的兩種引物、四種脫氧核苷酸和耐高溫的 DNA聚合酶。