Question

3．①為了獲得能合成纖維素酶的單菌落，可采用平板劃線法或稀釋涂布平板法將初篩菌液接種在固體（固體/液體）培養基上，這種培養基屬于選擇培養基．
②關于制備固體培養基的敘述，錯誤的是D．
A．制作固體培養基時可以加入瓊脂  B．待平板冷卻凝固約5～10min后將平板倒過來放置
C．待培養基冷卻至50℃左右時進行倒平板D．順序為計算、稱量、溶化、倒平板、滅菌
③下表的培養液pH均為4.8，若對MC-1中纖維素酶的活力進行測定，則不能選擇表中的哪幾種培養液A、B、C？（填字母）

培養液	纖維素	纖維素酶	NaNO3	牛肉膏	K2HPO4	KCl	MgSO4•7H2O	FeSO4
A	25g/L	-	-	-	1g/L	0.5g/L	1g/L	0.01g/L
B	-	-	3g/L	-	1g/L	0.5g/L	1g/L	0.01g/L
C	25g/L	1μg/L	-	3g/L	1g/L	0.5g/L	1g/L	0.01g/L
D	25g/L	-	3g/L	-	1g/L	0.5g/L	1g/L	0.01g/L

④某同學發現培養基上感染了幾種細菌．若在以尿素為唯一氮源的培養基中加入酚紅指示劑培養幾種菌后，指示劑變紅就可以鑒定其中含有能夠分解尿素的細菌；若在以纖維素為唯一碳源的培養基中加入剛果紅染料培養后，培養基中出現透明圈，就可以鑒定其中含有纖維素分解菌．

Answer 1

分析 1、微生物常見的接種的方法：
①平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落．
2、培養基按功能分：

種類	制備方法	特征	用途
選擇培養基	培養基中加入某種化學成分	根據某種微生物的特殊營養要求或其對某化學、物理因素的抗性而設計的培養基使混合菌樣中的劣勢菌變成優勢菌，從而提高該菌的篩選率	加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌
鑒別培養基	加入某種試劑或化學藥品	依據微生物產生的某種代謝產物與培養基中特定試劑或化學藥品反應，產生明顯的特征變化而設計	鑒別和區分菌落相似的微生物伊紅和美藍培養基可以鑒別大腸桿菌

解答 解：①純化微生物常用平板劃線法和稀釋涂布平板法接種在固體培養基上；為了獲得能合成纖維素酶的菌株MC-1，應該用選擇培養基．
②A．制作固體培養基時可以加入凝固劑--瓊脂，A正確；
B．待平板冷卻凝固約5～10min后將平板倒過來放置，B正確；
C．待培養基冷卻至50℃左右時進行倒平板，C正確；
D．操作的順序為計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板，D錯誤．
故選：D．
③分析題干信息可知，該實驗的目的是菌株MC-1中纖維素酶的活力，因此所用的培養基應該是纖維素作為唯一碳源的培養基，且培養基的基本成分應包括碳源，氮源、水和無機鹽，分析性表格中的培養基的成分可知，A培養基缺乏氮源，微生物不能生長；B沒有碳源，微生物應為無法生長，C不是以纖維素為唯一碳源，牛肉膏也可以作為碳源，因此A、B、C不能用于對MC-1中纖維素酶的活力進行測定的培養基．
④在以尿素為唯一氮源的培養基中加入酚紅指示劑培養幾種菌后，指示劑變紅就可以鑒定其中含有能夠分解尿素的細菌；若在以纖維素為唯一碳源的培養基中加入剛果紅染料，培養后，培養基中出現透明圈，就可以鑒定其中含有纖維素分解菌．
故答案為：
①平板劃線法或稀釋涂布平板    固體     選擇
②D  
③A、B、C    
④酚紅 剛果紅

點評 本題考查微生物的分離和培養，要求考生識記分離微生物的兩種常用方法，識記培養基的成分和培養基的分類，能結合題中信息準確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．