Question

20．圖是培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)路線．圖中tetR表示四環(huán)素抗性基因，ampR表示氨芐青霉索抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直線所示為三種限制酶的酶切位點(diǎn)．
據(jù)圖回答下面的問題．

（1）圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體，需用BamHI和HindIII限制酶同時(shí)酶切載體和人乳鐵蛋白基因．
（2）篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上進(jìn)行．能使人乳鐵蛋白基因在乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)的調(diào)控序列是A（填字母代號(hào)）．
A．啟動(dòng)子      B．teR    C．復(fù)制原點(diǎn)        D．a(chǎn)mpR
（3）過程①可采用的操作方法是顯微注射法．
（4）為檢測(cè)人乳鐵蛋白是否成功表達(dá)，可采用C（填字母代號(hào)）技術(shù)．
A．核酸分子雜交  B．基因序列分析  C．抗原-抗體雜交  D．PCR
（5）基因工程中最常用的載體是質(zhì)粒，除此之外，還可以有動(dòng)植物病毒和噬菌體的衍生物．

Answer 1

分析 結(jié)合題意分析圖解：圖中質(zhì)粒包括四環(huán)素抗性基因、氨芐青霉素抗性基因、啟動(dòng)子、復(fù)制原點(diǎn)，以及兩個(gè)限制酶切點(diǎn)，并且兩個(gè)限制酶切點(diǎn)的位置均在四環(huán)素抗性基因上；目的基因上有三個(gè)限制酶切點(diǎn)，與質(zhì)粒對(duì)照，共有的是BamH I、Hind III．
圖中①表示目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，②表示通過胚胎移植的方式將早期胚胎移植到代孕母牛體內(nèi)．

解答 解：（1）由圖中信息可知，載體上有HindⅢ和BamHⅠ酶切位點(diǎn)，目的基因上也有它們的酶切位點(diǎn)，應(yīng)用此這2種酶切．
（2）當(dāng)人乳鐵蛋白基因和質(zhì)粒連接成重組質(zhì)粒后，tet^R基因被人乳鐵蛋白基因隔開，不是完整的，而amp^R基因是完整的，所以篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上進(jìn)行．能讓目的基因開始表達(dá)的是啟動(dòng)子，啟動(dòng)子是RNA聚合酶特異性識(shí)別和結(jié)合的DNA序列，是基因的一個(gè)組成部分，控制基因表達(dá)（轉(zhuǎn)錄）的起始時(shí)間和表達(dá)的程度．
（3）將目的基因?qū)�入到�?dòng)物中常用顯微注射法．
（4）一般檢測(cè)目的基因是否表達(dá)里用抗原-抗體雜交的方法．
（5）基因工程中最常用的載體是質(zhì)粒，除此之外，還可以有動(dòng)植物病毒和噬菌體的衍生物．
故答案為：
（1）BamHI和HindIII   
（2）含氨芐青霉素   A
（3）顯微注射法 
（4）C
（5）動(dòng)植物病毒    噬菌體的衍生物

點(diǎn)評(píng) 本題難度適中，屬于考綱中識(shí)記、理解層次的要求，著重考查了基因工程的限制酶的作用特點(diǎn)、啟動(dòng)子的功能、目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞的方法等相關(guān)知識(shí)，要求考生具有一定的識(shí)圖能力，并能識(shí)記相關(guān)基礎(chǔ)知識(shí)．