Question

（12分）釀酒廠常用酸性脲酶去除酒精類飲品中的尿素，以改善酒精類飲品的品質。請回答下列問題：

（1）從土壤中篩選酸性脲酶生產菌，其培養基的主要成分有葡萄糖、尿素、瓊脂等，從功能上分析，該培養基屬于________________培養基。該培養基的氮源來自____________。

（2）篩選和純化酸性脲酶生產菌常用的兩種接種方法是_____________和____________。配制濃度梯度為10-1的系列稀釋液時，需用移液管將lmL菌液移入盛有_______________mL蒸餾水的試管中。

（3）對同一濃度的酸性脲酶生產菌稀釋液，分別用血球計數板計數和稀釋涂布平板法計數，若不存在實驗誤操作，則前者的數量____________（多于／等于／小于）后者，其原因是________________。

（4）若用海藻酸鈉固定含酸性脲酶的細菌時，應將海藻酸鈉溶液和細胞混合滴入溶液中。右表是不同濃度海藻酸鈉形成的凝膠珠狀況，從表中看出，海藻酸鈉的濃度應選用____________g／dL。若利用固定化酶技術，它的優點是_________________。

海藻酸鈉質量濃度（g/dL）	凝膠強度	凝膠氣泡量	成球難度	凝珠形狀
1.0	中	沒有	較易	扁圓形
2.0	中	少量	易	圓球形
3.0	強	較多	稍難	有托尾
4.0	強	大量	難	難成球形

Answer 1

（1）選擇 尿素 （2）平板劃線法 稀釋涂布平板法 9

（3）多于 有些菌落連接在一起，計數偏小 （4）CaCl2 2.0 可重復利用，且利于產物的純化

【解析】

試題分析：（1）從功能上分析，該培養基用于篩選酸性脲酶生產菌，屬于選擇培養基。從培養基的成分分析，該培養基的氮源來自尿素。

（2）篩選和純化菌種常用的接種方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。配制濃度梯度為10-1的系列稀釋液時，需用移液管將lmL菌液移入盛有9mL蒸餾水的試管中。

（3）用血球計數板計數和稀釋涂布平板法計數時，若不存在實驗誤操作，由于有些菌落連接在一起，計數偏小，則前者的數量多于后者。

（4）若用海藻酸鈉固定含酸性脲酶的細菌時，海藻酸鈉形成的凝膠珠應為圓球形，從表中看出，海藻酸鈉的濃度應選用2.0g／dL。固定化酶技術的優點是可重復利用，且利于產物的純化。

考點：本題考查生物技術實踐的相關知識，意在考查考生能理解所學知識的要點，把握知識間的內在聯系，形成知識網絡的能力。

考點分析： 考點1：微生物的利用 考點2：酶的應用 試題屬性

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