Question

在某些深海魚中發現的抗凍蛋白基因afp對提高農作物的抗寒能力有較好的應用價值．如圖所示獲得轉基因萵苣的技術流程，請據圖回答下列問題：
（1）進行基因工程操作，首先必須將含有抗凍蛋白基因的DNA分子從細胞內提取出來．在實驗室中從魚的紅細胞中提取DNA，可以先根據DNA和蛋白質等在不同濃度的NaCI溶液中

 

的 不同，初步分離，然后進一步分離．在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會呈

 

色，因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑．
（2）①過程需要的酶有

 

、

 

．
（3）如果受體細胞C₁是土壤農桿菌，則導入它的目的是利用農桿菌的

 

，
使目的基因進入受體細胞C₂，并將其插入到受體細胞C₂中

 

上，使目的基因的遺傳特性得以穩定維持和表達，形成轉基因萵苣．經②過程獲得的轉基因萵苣中的目的基因是否表達，在分子水平上可用

 

方法進行檢測，如果出現雜交帶，說明目的基因已經表達蛋白質產品，轉基因萵苣培育成功．
（4）若受體細胞為牛的受精卵，則受精卵分裂的方式為

 

，將此受精卵發育成的胚胎進行分割移植時，應選擇發育良好、形態正常的

 

，要注意將

 

均等分割，否則會影響分割后的恢復和進一步發育．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術,胚胎分割移植

專題：

分析：（1）獲取目的基因的主要途徑有從自然界已有的物種中分離和人工合成．①DNA在NaCl溶液中的溶解度隨NaCl濃度的不同而不同．當NaCl的濃度為0.14mol/L時，DNA的溶解度最低．利用這一原理，可使溶解在NaCl溶液中的DNA析出．②DNA不溶于酒精溶液，但是細胞中的其他許多物質溶于酒精溶液．利用這一原理，可以進一步提取含雜質較少的DNA．③DNA遇二苯胺（沸水浴）會染成藍色；DNA還有遇甲基綠溶液被染成藍綠色的特性．上述兩種方法均可用于鑒定DNA的存在．
（2）①過程為基因表達載體的構建過程，需要用到限制酶，切開特定的磷酸二酯鍵，形成粘性末端，DNA連接酶，連接磷酸二酯鍵．
（3）一個完整的基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因．
（4）農桿菌轉化法利用的是農桿菌的轉化作用，將目的基因整合到受體細胞的染色體DNA上，進而使目的基因能夠穩定遺傳和表達．檢測目的基因是否成功表達可采用抗原--抗體雜交法．

解答： 解：（1）DNA在NaCl溶液中的溶解度隨NaCl濃度的不同而不同，DNA遇二苯胺（沸水浴）會染成藍色；DNA還有遇甲基綠溶液被染成藍綠色的特性．
（2））①過程為基因表達載體的構建過程，需要用到限制酶，DNA連接酶．
（3）農桿菌轉化法利用的是農桿菌的轉化作用，將目的基因整合到受體細胞的染色體DNA上，進而使目的基因能夠穩定遺傳和表達．檢測目的基因是否成功表達可采用抗原--抗體雜交法．
（4）受精卵的分裂方式為有絲分裂，胚胎移植時，需要在桑椹胚或囊胚時期，對內細胞團進行均等分割，否則會影響胚胎的恢復和發育．
故答案為：
（1）溶解度  藍
（2）限制性內切酶（限制酶）  DNA連接酶
（3）轉化作用  染色體的DNA  抗原-抗體雜交
（4）有絲分裂  桑椹胚或囊胚  內細胞團

點評：此題主要考查基因工程的原理和應用，胚胎工程等知識點，意在考查學生對基礎知識的理解和綜合運用能力．難度適中．