Question

【題目】下圖中的供體DNA中含有無限增殖調控基因，該基因能激發動物細胞的分裂，圖示是利用該基因和小鼠制備新型單克隆抗體的過程。

（1）該過程的目的基因是_________，質粒被酶A切割后形成_________個游離的磷酸。經酶A處理后的Ⅰ與質�？僧a生相同的_________，所以能夠實現重組。

（2）圖中將目的基因導入受體細胞的適宜方法是_________，Ⅱ細胞是已免疫_________。

（3）通常用_________培養基進行篩選獲得Ⅲ細胞，Ⅲ細胞的特點是既能無限增殖，又能_________。

（4）該過程涉及到的生物技術有_________（答出兩點）。

Answer 1

【答案】無限增殖調控基因2黏性末端顯微注射法B淋巴細胞選擇性產生專一性抗體轉基因技術（DNA重組技術）、動物細胞培養技術

【解析】

分析題圖：酶A是限制性核酸內切酶；酶B是DNA連接酶。II細胞具有分泌抗體的能力；重組細胞Ⅲ既有無限增殖的能力，又能分泌特異性抗體。圖中涉及的技術主要有轉基因技術和動物細胞培養技術。

（1）據圖可知，圖示是利用該基因和小鼠制備新型單克隆抗體的過程，因此需要細胞III既能無限增殖又能產生抗體，細胞III內應含有無限增殖調控基因，即無限增殖調控基因是該過程的目的基因，質粒被酶A切割后，質粒變為線性雙鏈DNA分子，因每條鏈上含有一個游離的磷酸基團，因此切割后含有兩個游離的磷酸基團。經酶A處理后的Ⅰ與質粒可產生相同的黏性末端，所以能夠實現重組。

（2）將目的基因導入不同細胞用不同的方法。導入植物細胞：農桿菌轉化法（轉基因抗蟲棉用的是花粉管通道法）；導入動物細胞：顯微注射技術（注射入受精卵中）；導入原核生物：一般是將細菌用氯化鈣處理，以增大細菌細胞壁的通透性，使含有目的基因的重組質粒進入受體細胞。圖中的受體細胞為動物細胞，因此采用的適宜方法為顯微注射法，圖中是生產單克隆抗體的過程，因此Ⅱ細胞是已免疫B淋巴細胞。

（3）單克隆抗體制備過程中，總共有兩次篩選，第一次篩選出雜交瘤細胞，第二次篩選出能產生特異性抗體的雜交瘤細胞，兩次篩選均需要用選擇性培養基進行篩選獲得Ⅲ細胞，Ⅲ細胞的特點是既能無限增殖，又能產生專一性抗體。

（4）據圖可知該過程涉及到的生物技術有轉基因技術（DNA重組技術）、動物細胞培養技術。