Question

12．農業生產中發現一種廣泛使用的除草劑（含氮有機化合物）在土壤中不易降解，長期使用可導致土壤污染．為修復被該除草劑污染的土壤，可按如圖所示選育能降解該除草劑的細菌（已知該除草劑在水中溶解度低，含一定量該除草劑的培養基不透明）．請據圖回答：

（1）制備土壤浸出液時，為避免菌體濃度過高，需將浸出液進行稀釋處理．
（2）從物理性質、用途方面來看，欲從長期使用該除草劑的土壤中分離目的菌，上述培養皿中培養基應具備的特點是在無氮固體培養基中添加了該除草劑．
（3）微生物接種的方法很多，最常用的是圖中的平板劃線法和稀釋涂布平板法．
（4）在劃線培養時，只有很少的菌落出現，大部分細菌在此培養基上不能生長的主要原因是培養基中缺少這些細菌可利用的氮源（或答“缺少氮源”）或有氧條件抑制了這些細菌的生長．
（5）在固體培養基上形成的菌落中，無透明帶菌落利用的氮源主要是氮氣，有透明帶菌落利用 的氮源主要是該除草劑，據此可篩選出目的菌．

Answer 1

分析 解答本題需掌握：從土壤中分離目的菌要用固體的選擇培養基；培養液中缺少大部分細菌可利用的氮源或有氧條件抑制了大部分細菌的生長；在固體培養基中，無透明帶菌落利用的氮源主要是氮氣；有透明帶菌落利用的氮源主要是除草劑，據此可篩選出目的菌．

解答 解：（1）制備土壤浸出液時，為避免菌體濃度過高，需將浸出液進行稀釋處理．
（2）從物理性質方面來看，題圖培養皿中培養基屬于固體培養基；從用途方面來看，該培養皿中培養基屬于選擇培養基．該除草劑為含氮有機化合物，降解該除草劑的細菌可以以除草劑為氮源．故該培養基中除加入除草劑外，不再含有其他氮源，以選擇出能降解該除草劑的細菌．
（3）接種微生物常用平板劃線法和稀釋涂布平板法．
（4）在以該除草劑為唯一氮源的培養基上，不能降解該除草劑的細菌（除具有固氮能力的細菌外）是不能生長的．因此，在劃線培養時，只有很少的菌落出現，大部分細菌在此培養基上不能生長．
（5）在固體培養基上形成的菌落中，無透明帶菌落利用的氮源主要是氮氣，有透明帶菌落利用的氮源主要是該除草劑，據此可篩選出目的菌．
故答案為：
（1）稀釋
（2）在無氮固體培養基中添加了該除草劑
（3）平板劃線稀釋涂布平板
（4）培養基中缺少這些細菌可利用的氮源（或答“缺少氮源”）
（5）氮氣該除草劑

點評 微生物培養的實驗，是“生物知識內容表”所列的生物實驗，包括理解實驗目的、原理、方法和操作步驟，考生需掌握相關的操作技能，并能將這些實驗涉及的方法和技能進行綜合運用及實驗分析能力．