Question

13．從自然界微生物中篩選某菌種的一般步驟是采集菌樣→富集培養→純種分離→性能測定．富集培養指創設僅適合待分離微生物旺盛生長的特定環境條件，使其群落的數量大大增加，從而分離出所需微生物的培養方法．
（1）接種前要對培養基進行高壓蒸汽滅菌處理．在整個微生物的分離和培養過程中，一定要注意在無菌條件下進行．
（2）不同微生物的生存環境不同，獲得理想微生物的第一步是從適合的環境采集菌樣，然后再按一定的方法分離、純化．如培養纖維素分解菌的菌樣應從富含纖維素的環境中采集．
（3）從土壤中篩選纖維素分解菌需要配制選擇培養基（按用途分類），該培養基中需要加入纖維素粉作為唯一的碳源．
（4）經過梯度稀釋后，要將樣品均勻涂布在用于鑒別纖維素分解菌的培養基上，在該培養基中需要加入的特殊染料是剛果紅，當形成菌落以后可以根據菌落周圍是否產生透明圈來篩選纖維素分解菌．某同學在純化土壤中的細菌時，發現培養基上的菌落連成一片，最可能的原因是菌液濃度過高（土壤溶液稀釋不夠）．

Answer 1

分析 （1）微生物培養的程序：a．器具的滅菌、b．培養基的配制、c．培養基的滅菌、倒平板、d．微生物接種、e．恒溫箱中培養、f．菌種的保存；在培養的過程中一定要注意無菌操作．
（2）選擇培養基：選擇培養基是根據不同微生物在代謝過程中所需要的營養物質和環境不同而配制的．不同微生物對某些化學藥品的抵抗力不同．利用這些特點，我們便可配制出適于某些微生物生長而抑制其他微生物的選擇培養基，例如從土壤中分離放線菌時，可在培養基中加入10%的酚數滴，抑制細菌和真菌的生長；根據對營養物質的特殊的需求，可以選擇不同的微生物，比如尿素分解菌的氮源是尿素，纖維素分解菌的碳源是纖維素．
（3）剛果紅染色法篩選纖維素分解菌的原理：剛果紅是一種染料，它可以與像纖維素這樣的多糖物質形成紅色復合物，但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發生這種反應．當我們在含有纖維素的培養基中加入剛果紅時，剛果紅能與培養基中的纖維素形成紅色復合物．當纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅-纖維素的復合物就無法形成，培養基中會出現以纖維素分解菌為中心的透明圈．這樣，我們就可以通過是否產生透明圈來篩選纖維素分解菌．

解答 解：（1）微生物的培養最重要的程序之一就是防止雜菌的污染，防止雜菌的污染首先要對培養基進行滅菌處理，培養基滅菌的方式是高壓蒸汽滅菌法；在微生物接種的操作中也要注意無菌操作．
（2）分離纖維素分解菌要從富含纖維素的環境中尋找，以纖維素為唯一碳源的培養基上進行選擇，就可以分離到纖維素分解菌．
（3）以纖維素為唯一碳源的培養基屬于選擇培養基．
（4）剛果紅可以和纖維結合形成紅色復合物，纖維素分解菌將纖維素分解以后，紅色復合物消失，會形成透明圈；純化土壤中的細菌時，發現培養基上的菌落連成一片，最可能的原因是菌液濃度過高（土壤溶液稀釋不夠）．
故答案為：
（1）高壓蒸汽滅菌　無菌　
（2）富含纖維素　
（3）選擇　碳源　
（4）剛果紅　透明圈　菌液濃度過高（土壤溶液稀釋不夠）

點評 本題主要考查了培養基的制備、微生物的篩選與培養等有關知識，微生物的分離要根據微生物不同的嗜好，配制不同的培養基，在復習的過程中注意總結．