Question

9．蝦青素具有很強的抗光氧化能力，能有效防止果實在高溫和強光下被灼傷．蘋果缺乏?-胡蘿卜素酮化酶基因（bkt）（合成蝦青素的關鍵基因），不能合成蝦青素．如圖表示研究者培育轉bkt基因蘋果的流程圖（gus為能在蘋果細胞表達的基因）．請據圖回答下列問題

（1）步驟①中bkt基因能在蘋果細胞表達，需與gus基因的啟動子、終止子重組在一起，bkt兩端應具有BamHⅠSacⅠ酶切位點．
（2）步驟③，為了獲得含有重組Ti質粒的農桿菌，將重組Ti質粒與處于感受態的農桿菌混合．
（3）導人成功后，由于農桿菌等細菌對植物細胞的生長不利，可在培養基中添加抗生素，抑制農桿菌等細菌生長．
（4）轉基因成功的鑒定：可把轉基因蘋果至于高溫、強光條件下培養，觀察其生長狀況．
（5）為了使轉基因蘋果的生產不受季節、氣候及地域的限制，選擇B中培養得到的胚狀體、不定芽、頂芽、葉芽，經包裝得到人工種子．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示表示研究者培育轉bkt基因蘋果的流程圖，其中①表示獲取目的基因的過程；②表示基因表達載體的構建過程；③④表示采用農桿菌轉化法將目的基因導入受體細胞；⑤表示脫分化過程；⑥表示再分化過程．

解答 解：（1）由圖可知，啟動子與bkt基因的結合部位有BamHⅠ酶切位點，bkt基因與終止子結合位點有SacⅠ酶切位點，因此bkt兩端應具有BamHⅠ和SacⅠ酶切位點．
（2）將目的基因導入微生物細胞常用感受態細胞法，即用氯化鈣處理微生物細胞，使其處于易于吸收周圍環境中DNA分子的感受態．因此步驟③中，為了獲得含有重組Ti質粒的農桿菌，將重組Ti質粒與處于感受態的農桿菌混合．
（3）抗生素能抑制細菌的生長，因此導人成功后，由于農桿菌等細菌對植物細胞的生長不利，可在培養基中添加抗生素，抑制農桿菌等細菌生長．
（4）蝦青素具有很強的抗光氧化能力，能有效防止果實在高溫和強光下被灼傷．因此，轉基因（bkt基因）成功的鑒定方法是：把轉基因蘋果至于高溫、強光條件下培養，觀察其生長狀況．
（5）為了使轉基因蘋果的生產不受季節、氣候及地域的限制，選擇B中培養得到的胚狀體、不定芽、頂芽、葉芽，經包裝得到人工種子．
故答案為：
（1）BamHⅠSacⅠ
（2）感受態
（3）抗生素
（4）高溫、強光
（5）胚狀體、不定芽、頂芽、葉芽

點評 本題結合圖解，考查基因工程和植物組織培養的相關知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟的細節；識記植物組織培養的過程，掌握植物組織培養技術的相關應用，能結合所學的知識準確答題．