Question

19．回答下列有關單克隆抗體的制備和轉基因動物培養的問題．
（1）某H蛋白質是一種抗原蛋白，該蛋白也是一種跨膜蛋白，其結構如圖所示（抗原特性由胞外區決定）．
①制備免疫小鼠用的H蛋白（抗原）時，應構建胞外區基因，轉入原核細胞表達并提純．
②B淋巴細胞成熟于骨髓（填“器官名稱”）中．
③若要制備抗H蛋白單克隆抗體，所培養的雜交瘤細胞是由骨髓瘤細胞和接受過H蛋白刺激的B淋巴細胞的融合而成的雜交瘤細胞．培養過程中應保持培養箱中含有5%的CO₂的目的是維持培養液的pH．除了含有各種營養成分，滿足適宜的溫度和酸堿性外，通常還要在細胞培養液中添加一定量的抗生素，以防止培養過程中的污染．此外，應定期更換培養液，以便清除代謝產物，防止細胞代謝產物積累對細胞自身造成傷害．
（2）胚胎干細胞（ES）可由囊胚的內細胞團分離培養獲得，導入外源基因的干細胞經擴大培養誘導分化為早期胚胎，隨后即可植入經同期發情處理的代孕雌性動物體內，獲得轉基因動物．

Answer 1

分析 1、單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發生免疫反應，之后從小鼠脾臟中獲取已經免疫的B淋巴細胞；誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養，即用培養基培養和注入小鼠腹腔中培養；最后從培養液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體．
2、胚胎移植的基本程序主要包括：①對供、受體的選擇和處理（選擇遺傳特性和生產性能優秀的供體，有健康的體質和正常繁殖能力的受體．用激素進行同期發情處理，用促性腺激素對供體母牛做超數排卵處理）；②配種或人工授精；③對胚胎的收集、檢查、培養或保存（對胚胎進行質量檢查，此時的胚胎應發育到桑椹或胚囊胚階段）；④對胚胎進行移植；⑤移植后的檢查．

解答 解：（1）①H蛋白是一種抗原蛋白，也是一種跨膜蛋白，且抗原特性由胞外區決定，因此制備免疫小鼠用的H蛋白（抗原）時，應構建胞外區基因，轉入原核細胞表達并提純．
②B淋巴細胞成熟于骨髓中．
③若要制備抗H蛋白單克隆抗體，所培養的雜交瘤細胞是由骨髓瘤細胞和接受過H蛋白刺激的B淋巴細胞的融合而成的．5%的CO₂的目的是維持培養液的pH．在細胞培養液中添加一定量的抗生素，以防止培養過程中的污染．此外，應定期更換培養液，以便清除代謝產物，防止細胞代謝產物積累對細胞自身造成傷害．
（2）胚胎干細胞（ES）來自早期胚胎（囊胚的內細胞團）和原始性腺．胚胎移植時，需要對供體和受體進行同期發情處理，使供受體具有相同的生理狀態，保證胚胎移植入相同的生理環境．
故答案為：
（1）①胞外    ②骨髓     ③H蛋白   pH    抗生素     更換培養液
（2）內細胞團     同期發情

點評 本題考查單克隆抗體的制備、胚胎移植等知識，要求考生識記單克隆抗體的制備過程；識記胚胎移植的基本程序，掌握胚胎移植的生理學基礎，能結合圖中信息準確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．