Question

【題目】尿素是一種重要的農業肥料，需經細菌的分解才能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物種類和數量繁多，下列是從土壤中分離分解尿素細菌的有關問題，請分析回答：

（1）上圖是利用________法進行微生物接種，把聚集的菌種逐步________到培養基的表面。

（2）下面是兩種培養基配方

表1：A培養基配方

KH2PO4	Na2HPO4	MgSO4· 7H2O	葡萄糖	尿素	瓊脂	H2O
1.4 g	2.1 g	0.2 g	10.0 g	1.0 g	15.0 g	1000 mL

表2：B培養基配方

纖維素粉	NaNO3	Na2HPO4· 7H2O	KH2PO4	MgSO4· 7H2O	KCl	酵母浸膏	H2O
5 g	1 g	1.2 g	0.9 g	0.5 g	0.5 g	0.5 g	1000 mL

①配制培養基的操作步驟________(用字母順序回答)。

a．倒平板　b．計算　c．溶化　d．稱量 e．滅菌

②通常培養基采用________滅菌，在制備固體培養基的倒平板操作時，平板冷凝后，應將平板倒置，目的是______________________。

③如果要分離土壤中能分解尿素的細菌，應選擇上述__________(A、B)配方的培養基，在該培養基中加入________指示劑，可初步鑒定出該種細菌能否分解尿素。

④據B培養基的成分，所培養微生物的同化作用類型是______________________。

Answer 1

【答案】平板劃線 稀釋(分散、分離) bdcea 高壓蒸汽滅菌法 防止培養皿內壁上出現的冷凝水污染培養基 A 酚紅 異養型

【解析】

1、微生物常見的接種的方法：

①平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板，接種、劃線，在恒溫箱里培養，在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落。

2、選擇培養基是根據某種微生物的特殊營養要求或其對某化學、物理因素的抗性而設計的培養基使混合菌樣中的劣勢菌變成優勢菌，從而提高該菌的篩選率。

（1）由圖可知，主要利用平板劃線法進行微生物接種，把聚集的菌種逐步分散到培養基的表面。

（2）①配制培養基的操作步驟為：計算各組分配比—稱量—加水溶解—高溫滅菌—倒平板，故本題正確答案為bdcea。

②通常培養基采用高壓蒸汽法滅菌，在制備固體培養基的倒平板操作時，平板冷凝后，應將平板倒置，否則培養皿內壁上出現的冷凝水可能污染培養基。

③如果要分離土壤中能分解尿素的細菌，應選擇富含尿素的培養基，即A培養基。在該培養基中加入酚紅指示劑，可以檢測是否有脲酶的分泌，可初步鑒定出該種細菌能否分解尿素。

④因為B培養基中有酵母浸膏，可以為微生物生長提供能量，所培養微生物的同化作用類型為異養型。