Question

酶解法制備原生質體的原理是利用酶溶液對細胞壁成分的降解作用．蝸牛酶液從蝸牛（以植物為食）消化腺中提取；果膠酶、纖維素酶從微生物中提取．為了研究不同酶液的酶解效果，某實驗小組取無菌煙草幼葉，切成相同大小的小片，等量放入6支試管中，試劑用量和實驗結果列于下表．請回答有關問題．

試管編號 項目	Ⅰ	Ⅱ	Ⅲ	Ⅳ	V	Ⅵ
蒸餾水（mL）	2	O	1	1	1	1
緩沖液（mL）	0	2	1	0.5	0.5	0.5
果膠酶液（mL）	O	0	O	0.5	O	0
蝸牛酶液（mL）	O	0	O	O	0.5	0
纖維素酶液（mL）	0	O	0	O	0	0.5
實驗結果 （綠色深淺程度）	-	-	-	+++	++++	++

（注：“+”越多表示綠色越深，“一”表示顏色無顯著變化）
（1）實驗過程中，需要輕搖試管，其目的是

 

，使原生質體從葉小片中游離出來，以便觀察懸浮液綠色的深淺．
（2）從綠色的深淺可推測：蝸牛酶液酶解效果最好，原因是蝸牛酶液含有

 

  等多種酶．該實驗中

 

 是空白對照組，其設置意義是

 

．
（3）用網篩過濾原生質體到離心管內，離心后收集沉淀物，并用

 

  洗滌．
（4）原生質體是否符合要求還需進行檢驗，其檢驗的方法是

 

．

Answer 1

考點：酶活力測定的一般原理和方法

專題：

分析：本題綜合考查原生質體的制備方法．
原生質體是植物細胞去除細胞壁后的結構，而去除細胞壁需用相應的酶（纖維素酶和果膠酶）進行處理．

解答： 解：（1）實驗過程中，需要輕搖試管，以使細胞壁與酶充分接觸，提高酶解效果．
（2）蝸牛以植物為食，所以唾液中含有果膠酶和纖維素酶，I、Ⅱ、Ⅲ沒有添加酶溶液為空白對照組．其目的是排除無關變量的干擾．
（3）離心后收集沉淀物，并用等滲溶液清洗，目的是保持細胞正常形態．
（4）要用低滲漲破法來檢驗原生質體是否符合要求，若沒有細胞壁則可以漲破，有則不能漲破．
故答案為：
（1）為了使細胞壁與酶充分接觸，提高酶解效果
（2）果膠酶和纖維素酶              I、Ⅱ、Ⅲ排除無關變量的干擾   
（3）等滲溶液
（4）低滲漲破法

點評：本題以圖表為載體，考查學生獲取和處理信息的能力，分析和解決問題的能力．實驗過程中可以變化的因素稱為變量．其中人為改變的變量稱做自變量，隨著自變量的變化而變化的變量稱做因變量．除自變量外，實驗過程中可能還會存在一些可變因素，對實驗結果造成影響，這些變量稱為無關變量．要注意無關變量應該相同且適宜．