Question

17．痤瘡丙酸桿菌引發免疫反應造成了青春痘，某公司靶向定位細菌內CAMP基因，該基因編碼CAMP蛋白對宿主細胞有殺傷作用．若CAMP抗體與細菌產生的CAMP蛋白相結合，即可抑制該細菌對宿主細胞的影響．其研究流程如下：
CAMP基因$\stackrel{導入}{→}$蘿卜$\stackrel{少量的蘿卜葉撒入小鼻腔}{→}$提取小鼠體內CAMP蛋白抗體$\stackrel{→}{混合}$痤瘡丙酸桿菌菌落→注入小鼠
（1）不能將CAMP基因直接導入蘿卜細胞的原因是目的基因不能在小鼠細胞穩定存在和表達，因此需構建基因表達載體，將基因表達載體導入蘿卜細胞的常用方法是農桿菌轉化法，其中用作運載體的是Ti質粒．
（2）檢測在蘿卜細胞中CAMP基因是否編碼產生CAMP基因是否編碼產生CAMP蛋白，應用抗原-抗體雜交方法，若出現雜交帶，則說明該基因能正常表達．
（3）現該公司預生產特異性強、靈敏度高并可大量制備的CAMP蛋白抗體，應采用單克隆抗體技術，最終可在細胞培養液或小鼠腹水中獲取CAMP蛋白抗體．

Answer 1

分析 基因工程的基本操作程序
第一步：目的基因的獲取
第二步：基因表達載體的構建
第三步：將目的基因導入受體細胞
將目的基因導入植物細胞：采用最多的方法是農桿菌轉化法，其次還有基因槍法和花粉管通道法等．
第四步：目的基因的檢測和表達
1、首先要檢測轉基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子雜交技術．
2、其次還要檢測目的基因是否轉錄出了mRNA，方法是采用用標記的目的基因作探針與mRNA雜交．
3、最后檢測目的基因是否翻譯成蛋白質，方法是從轉基因生物中提取 蛋白質，用相應的 抗體進行抗原-抗體雜交．
4、有時還需進行個體生物學水平的鑒定．如轉基因抗蟲植物是否出現抗蟲性狀．

解答 解：（1）由于目的基因不能在小鼠細胞穩定存在和表達，因此不能將CAMP基因直接導入蘿卜細胞，因此需構建基因表達載體，將基因表達載體導入蘿卜細胞的常用方法是農桿菌轉化法，其中用作運載體的是Ti質粒．
（2）檢測在蘿卜細胞中CAMP基因是否編碼產生CAMP基因是否編碼產生CAMP蛋白，應用抗原-抗體雜交方法，若出現雜交帶，則說明該基因能正常表達．
（3）單克隆抗體的優點有：特異性強、靈敏度高、化學性質單一等．單克隆抗體技術，最終可在細胞培養液或小鼠腹水中獲取CAMP蛋白抗體．
故答案為：
（1）目的基因不能在小鼠細胞穩定存在和表達        基因表達載體       農桿菌轉化法      Ti質粒
（2）抗原-抗體雜交                   雜交帶
（3）單克隆抗體             小鼠腹水

點評 本題考查了基因工程和單克隆抗體制備的有關知識，要求學生能夠掌握基因工程的操作步驟，識記目的基因導入受體細胞以及目的基因鑒定與鑒定的方法，識記單克隆抗體制備的過程和優點，再結合題意準確作答．