Question

5．有些細(xì)菌可分解原油，從而消除由原油泄漏造成的土壤污染．某同學(xué)欲從污染的土壤中篩選出高效降解原油的菌株．回答問題：
（1）在篩選過程中，應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以原油為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，從功能上講，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（2）為了篩選出高效菌株，可比較單菌落周圍分解圈的大小，分解圈大說明該菌株的降解能力強(qiáng)．
（3）通常情況下，在微生物培養(yǎng)過程中實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌．無菌技術(shù)要求試驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行，以避免周圍環(huán)境中微生物的污染．
（4）分解尿素的細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解為氨，使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)．利用這一原理對菌種進(jìn)行鑒定，方法是在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑培養(yǎng)細(xì)菌，若指示劑變紅，說明該種細(xì)菌能夠分解尿素．
（5）某同學(xué)用稀釋涂布平板法測定水樣中的大腸桿菌的含量時(shí)，在3個(gè)平板上用稀釋涂布平板法接入稀釋倍數(shù)為10⁴稀釋液0.2mL，經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為51、52和53．則每升水樣中大腸桿菌數(shù)為2.6×10⁹．

Answer 1

分析 （1）培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽．培養(yǎng)基的分類：①按物理性質(zhì)分，分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基，固體培養(yǎng)基中含有凝固劑，一般是瓊脂．②按化學(xué)成分分，分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)．兩者的區(qū)別是天然培養(yǎng)基成分不確定，合成培養(yǎng)基成分的含量是確定的．③按用途分，分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基．選擇培養(yǎng)基主要是培養(yǎng)、分離特定的微生物，培養(yǎng)酵母菌可在培養(yǎng)基中加入青霉素；鑒別培養(yǎng)基可以鑒定不同的微生物，比如鑒別飲用水中是否含有大腸桿菌，可以用伊紅-美藍(lán)培養(yǎng)基，如果菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤，說明有大腸桿菌．
（2）常用滅菌方法：灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌法．
培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實(shí)驗(yàn)操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌和消毒方法依次：高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌、灼燒滅菌、化學(xué)消毒、紫外線滅菌、巴氏消毒法．
（3）接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法．接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)胞，并在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)細(xì)菌繁殖而成的子細(xì)胞群體--菌落．

解答 解：（1）欲篩選出能降解原油的菌株，培養(yǎng)基中應(yīng)只含有原油而無其它碳源，不能降解原油的細(xì)菌在此培養(yǎng)基上不能生存，這類培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（2）降解原油能力越強(qiáng)的菌株，在菌落周圍形成的分解圈越大．
（3）實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有灼燒滅菌（如接種環(huán)）、干熱滅菌（如培養(yǎng)皿）、高壓蒸汽滅菌（如培養(yǎng)基）等．無菌操作要求在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中操作都在酒精燈火焰附近進(jìn)行，以避免周圍微生物的污染．
（4）分解尿素的細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解為氨，使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)．利用這一原理對菌種進(jìn)行鑒定，方法是在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入 酚紅 指示劑培養(yǎng)細(xì)菌，若指示劑變紅，說明該種細(xì)菌能夠分解尿素．
（5）某同學(xué)用稀釋涂布平板法測定水樣中的大腸桿菌的含量時(shí)，在3個(gè)平板上用稀釋涂布平板法接入稀釋倍數(shù)為10⁴稀釋液0.2mL，經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為51、52和53．則每升水樣中大腸桿菌數(shù)為（51+52+53）÷3÷0.2×10⁴×10³=2.6×10⁹．
故答案為：
（1）原油    選擇        
（2）強(qiáng)
（3）干熱滅菌   高壓蒸汽滅菌    酒精燈火焰
（4）尿素    酚紅   該種細(xì)菌能夠分解尿素
（5）2.6×10⁹

點(diǎn)評 本題主要考查微生物培養(yǎng)的一些基本操作，意在加深學(xué)生對相關(guān)知識點(diǎn)的識記與理解．