Question

【題目】基因工程載體是DNA重組技術使用的基本工具。回答下列問題

（1）大腸桿菌的質粒常被用來做基因工程中的載體，其主要優點是_______________（至少兩項）。基因工程中常使用的載體除質粒外，還有_______________（至少兩項）。

（2）在進行基因工程操作中，真正被用作載體的質粒都是在天然質粒的基礎上進行人工改造過的。在構建基因表達載體時，通過人工改造，基因表達載體中除了含有目的基因外，還必須有_____________________。構建目的基因表達載體的目的一方面是使目的基因在受體細胞中_______________，并遺傳給下一代；另一方面，使目的基因能夠_______________，從而得到轉基因產品或生物。

（3）利用乳腺生物反應器來生產基因工程藥物時，與藥用蛋白基因連在一起的是__________啟動子，這樣才能使該目的基因在乳腺細胞中表達。

（4）農桿菌轉化法常用的載體為____________，構建此表達載體時，要將目的基因插入到質粒的___________上，這樣就能夠通過農桿菌的轉化作用使目的基因進入植物細胞并插入到染色體中DNA上，使目的基因的遺傳特性得以穩定維持和表達。

Answer 1

【答案】分子小，能自主復制，有標記基因，有多個酶切位點 λ噬菌體的衍生物、動植物病毒 啟動子、終止子和標記基因 穩定存在 表達并發揮作用 乳腺蛋白基因 Ti質粒 T—DNA

【解析】

運載體是基因工程進行所必須的工具，在進行目的基因的轉移時，常常需要將目的基因與運載體相結合，一般常用的運載體有質粒，噬菌體和動植物病毒。目的基因建構時，要保證形成的重組載體具有目的基因、啟動子、終止子和標記基因，識記基因工程的基本工具和操作步驟是本題的解題關鍵。

（1）基因工程中常使用的載體為質粒，質粒的優點有：分子小，分子上有一個至多個限制酶切割位點，供外源DNA片段插入，質粒可在細胞中進行自我復制，質粒DNA分子上有特殊的標記基因，供重組DNA的鑒定和選擇；除質粒外，λ噬菌體的衍生物、動植物病毒也是常用的基因工程載體；

（2）構建的表達載體應包括啟動子、終止子，以便驅動和停止轉錄，標記基因的作用是為了鑒別受體細胞中是否含有目的基因；構建目基因表達載體后，通過復制原點，目的基因一方面在受體細胞中穩定存在，可以遺傳給下一代；同時，在啟動子的調控下，目的基因能夠表達和發揮作用，從而得到轉基因產品或生物；

（3）如果要利用乳腺生物反應器來生產基因工程藥物，啟動子必須是乳腺蛋白基因的啟動子，這樣才能使該目的基因在乳腺細胞中表達；

（4）農桿菌轉化法常用的載體為Ti質粒，它含有一段可轉移的DNA，這段DNA可轉移至受體細胞，并且整合到受體染色體的DNA上；構建表達載體時，將目的基因插入到質粒的T—DNA上，就能夠使目的基因進入植物細胞并插人到染色體的DNA上，使目的基因的遺傳特性得以穩定維持和表達。