Question

綠色熒光蛋白基因（GFP）被發現以來，一直作為一個監測完整細胞和鲴織內基因表達及蛋白質位置的理想標記。請根據圖表回答下列問題。

（1）若圖中GFP的M端伸出的核苷酸的堿基序列是—TCGA—，N端伸出的核苷酸的堿基序列是—TGCA—，則在構建含該GFP的重組質粒A時，應選用的限制酶是__________。③過程需要的酶是__________。

（2）④過程將基因表達載體導入豬胎兒成纖維細胞常用的方法是__________。

（3）檢測GFP是否已重組到豬胎兒成纖維細胞的染色體DNA上，可采用__________技術進行檢測。

（4）用顯微鏡可觀察到用于⑥過程的豬卵母細胞的卵黃膜和透明帶之間有__________個極體。用于⑤過程的豬胎兒成纖維細胞，一般選用傳代10代以內的細胞，原因是__________。

（5）由⑦過程獲得的重組細胞培育成綠色熒光轉基因克隆豬，涉及到的現代生物技術手段有__________。

（6）為了加快繁殖速度，可采用胚胎分割的方法。若對⑧過程得到的囊胚階段胚胎進行分割，要注意__________。得到綠色熒光轉基因克隆豬（雌性）之后，可用__________處理，使之超數排卵，提高其繁育能力。

 

Answer 1

【答案】

 

【解析】本題綜合考查了基因工程、細胞工程和胚胎工程的相關知識，屬于對識記、理解層次的考查。能與—TCGA—互補配對的是—AGCT--，能與—TCGA--互補配對的是—ACGT--，則在構建含該GFP的重組質粒A時，應選用的限制酶是HindⅢ和PartⅠ。目的基因導入動物細胞常用的方法為顯微注射法。檢測目的基因是否進入受體細胞的方法為DNA分子雜交。傳代10代以內的細胞遺傳物質不會變化。