Question

6．在培育轉基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作為標記基因，只有含卡那霉素抗性基因的細胞才能在卡那霉素培養基上生長．如圖為獲得抗蟲棉技術流程．請據圖回答：

（1）基因工程的基本操作程序主要包括四個步驟：目的基因的獲取、基因表達載體的構建、將目的基因導入受體細胞、目的基因的檢測與鑒定．
（2）A過程需要的酶有限制酶和DNA連接酶．
（3）要把重組質粒導入土壤農桿菌，首先必須用Ca²⁺處理土壤農桿菌，使土壤農桿菌轉變為感受態；然后將重組質粒和感受態細胞在緩沖液中混合培養完成轉化過程．
（4）含有重組質粒的土壤農桿菌侵染離體棉花葉片組織后，將離體棉花葉片組織培養成再生植株要經過[C]脫分化和[E]再分化．如要確保再生植株中含有抗蟲基因，可在C過程的培養基中加入卡那霉素．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示為利用生物技術獲得生物新品種的過程示意圖，其中A表示基因表達載體的構建過程；B表示用選擇培養基篩選含有重組質粒的土壤農桿菌的過程；C表示脫分化過程；D表示愈傷組織，E表示再分化．

解答 解：（1）基因工程的基本操作程序主要包括四個步驟：目的基因的獲取、基因表達載體的構建、將目的基因導入受體細胞、目的基因的檢測與鑒定．
（2）圖中A為基因表達載體的構建過程，該過程需要限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和運載體，還需DNA連接酶將目的基因和運載體連接形成重組質粒．
（3）要把重組質粒導入土壤農桿菌，首先必須用Ca²⁺處理土壤農桿菌，使土壤農桿菌轉變為感受態；然后將重組質粒和感受態細胞在緩沖液中混合培養完成轉化過程．
（4）植物組織培養包括脫分化和再分化過程，即圖中C表示脫分化過程；D表示愈傷組織，E表示再分化．圖中標記基因是卡那霉素抗性基因，因此C過程的培養基除含有必要營養物質、瓊脂和激素外，還必須加入卡那霉素，以淘汰不含重組質粒的細胞．
故答案為：
（1）基因表達載體的構建　目的基因的檢測與鑒定
（2）限制酶　DNA連接酶
（3）Ca²⁺   感受　重組質粒和感受態細胞
（4）脫分化　再分化　卡那霉素

點評 本題結合轉基因抗蟲植株的培育過程圖，考查基因工程和植物組織培養的相關知識，要求考生識記基因工程的工具及操作步驟，能準確判斷圖中各過程的名稱；識記植物組織培養的過程及應用，能結合圖中信息答題．