Question

【題目】禽流感病毒會給家禽養殖業造成巨大的經濟損失，同時也威脅人類的健康。少數品種的雞的Mx蛋白具有禽流感抗病毒的作用。請回答下列問題：

（1）研究人員從某個品種的雞體內獲得Mx蛋白的mRNA，通過 _________ 法獲取Mx'基因。請從基因結構角庋將獲得的Mx'基因與雞體內的Mx基因進行比較： __________ 。

（2）培育轉基因雞的過程中，常用的受體細胞是 ________ ；在該過程中，若某種病毒可作為載體，是 因為該病毒能 _________。

（3）檢測上述轉基因雞體內Mx'基因是否成功表達，從分子水平上通常采用 _________ 方法，但合成的Mx'蛋白是否具有正常活性，還需要從生物個體水平上進行 _______實驗。

（4）已知Mx'基因整合到轉基因雞的一條常染色體上，現有多只具有抗禽流感性狀的轉基因雌雞、轉基因雄雞和非轉基因雄雞，請設計實驗進行驗證： ____________ 。

Answer 1

【答案】逆轉錄 Mx'基因不具有啟動子、內含子 受精卵 將目的基因整合進宿主細胞的DNA分子 抗原—抗體雜交 禽流感病毒感染 讓轉基因雌雞和轉基因雄雞進行雜交，若子代雌雄雞中抗禽流感個體與不抗禽流感個體的比例均為3：1。則證明Mx'基因整合到轉基因雞的一條常染色體上（或讓轉基因雌雞和非轉基因雄雞進行雜交，若子代雌雄雞中抗禽流感個體與不抗禽流感個體的比例均為1：1，則證明Mx'基因整合到轉基因雞的一條常染色體上）

【解析】

基因工程技術的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因——DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA——分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質——抗原——抗體雜交技術。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

（1）從某個品種的雞體內獲得Mx蛋白的mRNA，通過逆轉錄法獲取Mx'基因。獲得的Mx'基因屬于cDNA，與雞體內的Mx基因相比較，Mx'基因不具有啟動子、內含子、終止子等。

（2）培育轉基因雞的過程中，常用的受體細胞是受精卵；在該過程中，若某種病毒可作為載體，是因為該病毒能將目的基因整合進宿主細胞的DNA分子。

（3）檢測上述轉基因雞體內Mx'基因是否成功表達，從分子水平上通常采用抗原——抗體雜交方法，但合成的Mx'蛋白是否具有正�；钚�，還需要從生物個體水平上進行禽流感病毒感染實驗。

（4）要驗證Mx'基因整合到轉基因雞的一條常染色體上，可以讓轉基因雌雞和轉基因雄雞進行雜交，若子代雌雄雞中抗禽流感個體與不抗禽流感個體的比例均為3：1。則證明Mx'基因整合到轉基因雞的一條常染色體上（或讓轉基因雌雞和非轉基因雄雞進行雜交，若子代雌雄雞中抗禽流感個體與不抗禽流感個體的比例均為1：1，則證明Mx'基因整合到轉基因雞的一條常染色體上）。