Question

【題目】人工瘤胃模仿了牛羊等反芻動物的胃，可用來發酵處理秸稈，提高秸稈的營養價值。為了增強發酵效果，研究人員從牛胃中篩選纖維素酶高產菌株，實驗流程示意圖如下圖所示。

請回答下列問題：

（1）步驟A是_____________，可以通過此步驟增加__________________________。

（2）研究人員用_____________法篩選纖維素分解菌，這種方法能夠通過顏色反應直接對微生物進行篩選。培養基中透明圈的大小與纖維素酶的_____________有關。

（3）在涂布平板時，取少量菌液（不超過0.1mL）滴加到培養基表面，菌液量不宜過多的原因是_______________________________________。

（4）研究人員用篩選到的纖維素酶高產菌株甲和乙，在不同pH條件下進行發酵，測得發酵液中酶活性的結果見下表，推測菌株_____________更適合用于人工瘤胃發酵，理由是__________________________。

注：纖維素酶活性用U表示。

Answer 1

【答案】選擇培養纖維素分解菌的濃度剛果紅染色量與活性培養基表面的菌液會出現積液，導致菌體堆積，影響分離效果乙瘤胃是酸性環境，菌株乙在酸性環境下酶的活性更高

【解析】

纖維素分解菌的篩選實驗流程為：取樣、選擇培養、梯度稀釋、將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養基上、挑選產生透明圈的菌落。根據題圖，從牛胃中篩選纖維素酶高產菌株，首先從牛胃取樣，經過A步驟后進行梯度稀釋，故A應為選擇培養，目的是通過選擇培養增加纖維素分解菌的濃度，以確保能夠從樣品中分離得到所需要的微生物；纖維素分解菌的鑒別可以使用剛果紅染液，在培養基中加入剛果紅，可與培養基中的纖維素形成紅色復合物，當纖維素被分解后，不能形成紅色復合物，培養基中會出現以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌，透明圈越大，纖維素分解菌分泌的纖維素酶活性越高；在涂布平板時，由于培養基表面的菌懸液會出現積液，導致菌體堆積，影響分離效果，所以滴加到培養基表面的菌懸液量不宜過多。

（1）步驟A是選擇培養，該步驟可增加纖維素分解菌的濃度。

（2）篩選纖維素分解菌常用剛果紅染色法；培養基中透明圈的大小與纖維素酶的量和活性有關。

（3）在涂布平板時，菌液量不宜過多的原因是菌液過多會使培養基表面的菌液出現積液，導致菌體堆積，影響分離效果 。

（4）根據表中數據顯示，甲菌株在pH=8時酶活性最高，乙菌株在pH=5時酶活性最高，因為瘤胃是酸性環境，因此乙菌株更適合用于人工瘤胃發酵。