Question

4．如圖示動物細胞培養過程中，動物細胞增殖情況的變化曲線（圖中B、D兩點表示經篩選后繼續培養），請據圖回答：
（1）AB段可能發生了接觸抑制現象．
（2）運用細胞培養技術可以從哺乳動物的早期胚胎中獲得胚胎干細胞．進行細胞培養時，必須首先用胰蛋白酶（或“膠原蛋白酶”）處理內細胞團，使之分散成單個細胞．體外培養胚胎干細胞能否獲得動物器官？不能（填“能”或“不能”）．
（3）動物細胞培養培養液的成分中除了葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素等物質外，通常還要加入血清、血漿等一些天然成分．還需給予一定量的氣體，其中O₂的作用是是細胞新陳代謝所必需的．動物細胞培養過程中常在培養液里添加抗生素來防治污染；若保存細胞，通常在冷凍條件下，因為在這種條件下，細胞中酶的活性降低，細胞代謝速率降低．
（4）為制備單克隆抗體，需將特定抗原注射到小鼠體內，以此獲取B淋巴細胞，同時可選取圖中D點的細胞與該細胞經誘導劑-誘導融合形成雜交細胞．為篩選能夠產生單克隆抗體的雜交細胞，至少需要經過2次篩選才能達到目的．最終獲得的雜交細胞的特點是既能無限增值，又能產生大量的專一性的抗體．

Answer 1

分析 本題考查動物細胞培養的相關知識．
1、動物細胞培養的流程：取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉入培養瓶中進行原代培養→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續傳代培養．
2、細胞貼壁和接觸抑制：懸液中分散的細胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細胞貼壁．細胞數目不斷增多，當貼壁細胞分裂生長到表面相互抑制時，細胞就會停止分裂增殖，這種現象稱為細胞的接觸抑制．

解答 解：（1）當貼壁細胞分裂生長到表面相互接觸時，細胞就會停止分裂增殖，即會發生接觸抑制現象，AB段細胞停止增殖，可能發生了接觸抑制現象．
（2）進行細胞培養時，必須首先用胰蛋白酶（或“膠原蛋白酶”）處理內細胞團，使之分散成單個細胞．在體外培養胚胎干細胞不能獲得動物器官，因為胚胎干細胞在體外培養條件下可以增殖但不發生分化．
（3）動物細胞培養培養液的成分中除了葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素等物質外，通常還要加入血清、血漿等一些天然成分．還需給予一定量的氣體，其中O₂的作用是細胞新陳代謝所必需的．動物細胞培養過程中常在培養液里添加抗生素來防治污染；若保存細胞，通常在冷凍條件下，細胞中酶的活性降低，細胞代謝速率降低．
（4）為制備單克隆抗體，需將特定抗原注射到小鼠體內，以此獲取B淋巴細胞，同時可選取圖中D點的細胞與該細胞融合形成雜交細胞，因該點細胞已癌變．為篩選能夠產生單克隆抗體的雜交細胞，至少需要經過2次篩選，第一次為了篩選出雜交瘤細胞，第二次篩選出能產生抗體的雜交瘤細胞．最終獲得的雜交細胞的特點是既能無限增值，又能產生大量的專一性的抗體．
故答案為：
（1）接觸抑制
（2）胰蛋白酶（或“膠原蛋白酶”）   不能
（3）血清、血漿   是細胞新陳代謝所必需的  抗生素   冷凍  酶
（4）B淋巴（或“B”或“漿”）   D  2   既能無限增值，又能產生大量的專一性的抗體

點評 本題考查動物細胞的培養與單克隆抗體的制備，意在考察考生對生物學知識的理解能力和綜合分析能力，難度適中．