Question

[生物--選修3現代生物科技專題]
豬的基因和人類的基因存在一定的相似度．據報道經特殊處理的豬皮可在人身上存活3周左右，起保護創面免受感染的作用．移植豬皮后，還要在豬皮上開很多小口，在小口處植入患者的自體皮膚組織，自體皮膚慢慢生長，逐漸覆蓋原先創面，而豬皮最終會掉光．為了使移植的豬皮存活更長時間，有人設法導入人的相關基因（用P表示），獲得轉基因小白豬．其簡要流程如圖所示：

據圖中信息并結合課本知識回答：
（1）過程①中形成重組研蛆常用的酶有限制性核酸內切酶和

 

；將目的基因導入成纖維細胞常用的方法是

 

．
（2）過程②中，常用

 

酶處理，將皮膚組織塊分散戍單個成纖維細胞．在培養成纖維細胞時需要滿足的條件是無菌、無毒、通氣、適宜的溫度、pH以及

 

．
（3）圖中的卵母細胞應在體外培養到

 

，并作除去細胞核的處理；過程③中所用的技術是

 

；能代替圖中卵母細胞的還可以是

 

．
（4）圖示技術除可用于器官移植外，還用于

 

．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術,動物細胞與組織培養過程,動物細胞核移植技術

專題：

分析：根據圖示，可知①是基因表載體的構建、②是動物細胞培養、③是早期胚胎培養．
通過核移植技術形成重組細胞，首先對供體用促性腺激素處理，使其超數排卵；另需要將卵母細胞培養到減數第二次分裂中期才可以去核．
動物細胞培養基含有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質，另外需要無菌和無毒的環境．

解答： 解：（1）在構建表達載體時，要用同一種限制酶切割質粒和目的基因，使質粒和目的基因產生相同的末端，再用DNA連接酶連接成重組質粒．受體細胞是動物細胞，可以通過顯微注射法將目的基因轉化入受體細胞．
（2）動物細胞培養時，取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織），用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞．動物細胞培養需要在無菌、無毒的環境、營養物質充沛、適宜的溫度和PH、氣體環境等條件．
（3）卵母細胞應在體外培養到減數第二次分裂中期（或MII中期），并作除去細胞核的處理；過程③中所用的技術是（早期）胚胎體外培養；能代替圖中卵母細胞的還可以是去核的受精卵（或去核的卵細胞）．
（4）圖示技術除可用于器官移植外，還用于培育并繁殖優良品種家畜；作為生物反應器生成醫藥蛋白等．
故答案為：
（1）DNA連接酶      顯微注射法
（2）胰蛋白（或膠原蛋白）      營養
（3）減數第二次分裂中期（或MII中期）     （早期）胚胎體外培養     去核的受精卵（或去核的卵細胞）
（4）培育并繁殖優良品種家畜；作為生物反應器生成醫藥蛋白等

點評：本題綜合考查了細胞工程、胚胎工程和基因工程的相關知識，考生要識記基因工程的操作工具；掌握目的基因檢測和鑒定的方法；識記動物細胞培養的過程和培養條件等；明確卵母細胞在進行細胞核移植前的準備；識記胚胎工程和基因工程的相關應用．