Question

12．圖是利用正常大鼠制備轉(zhuǎn)基因大鼠的流程示意圖，回答下列問題．

（1）質(zhì)粒是環(huán)狀DNA分子，沒有游離端．當(dāng)質(zhì)粒用限制酶切割一次以后，形成2或0個(gè)黏性末端，若在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，選用同種限制酶來切割目的基因和質(zhì)粒，再用連接酶連接兩者之間的黏性末端，則會(huì)出現(xiàn)部分轉(zhuǎn)基因大鼠中目的基因不能正確表達(dá)的情況，其最可能的原因是同種限制酶切割形成的末端相同，部分目的基因與質(zhì)粒反向連接．
（2）卵母細(xì)胞除從活體輸卵管中采集外，還可以從處死的雌鼠卵巢中獲取，采集到的精致必須經(jīng)過獲能處理后，才能與卵母細(xì)胞結(jié)合，完成受精作用．
（3）在上述轉(zhuǎn)基因大鼠的培育過程中，所用到的主要胚胎工程技術(shù)是體外受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示是利用正常大鼠制備遺傳性高血壓轉(zhuǎn)基因模型大鼠的流程圖．圖中包括體外受精過程、采用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將目的基因?qū)�入受精卵的過程、早期胚胎發(fā)育過程以及胚胎移植過程．

解答 解：（1）質(zhì)粒是環(huán)狀DNA分子，沒有游離端．當(dāng)質(zhì)粒用限制酶切割一次以后，如果形成的是黏性末端，有2個(gè)末端；如果形成的是平口末端，即0個(gè)黏性末端，若在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，選用同種限制酶來切割目的基因和質(zhì)粒，同種限制酶切割形成的末端形同，部分目的基因與質(zhì)粒在DNA連接酶的催化下反向連接，將會(huì)出現(xiàn)部分轉(zhuǎn)基因大鼠中目的基因不能正確表達(dá)的情況．
（2）卵細(xì)胞一般可從雌鼠的輸卵管或卵巢中獲取．精子需要獲能后才可以進(jìn)行受精作用．
題圖中的高血壓相關(guān)基因作為目的基因，質(zhì)粒作為載體，二者需用同種限制性核酸內(nèi)切酶切割后才能連接成重組載體，該過程與質(zhì)粒上有限制酶切割位點(diǎn)有關(guān)．
（3）當(dāng)受體細(xì)胞為動(dòng)物細(xì)胞時(shí)，一般選擇受精卵，即圖中體外受精形成的受精卵．再利用顯微注射法將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，然后進(jìn)行早期胚胎培養(yǎng)，再進(jìn)行胚胎移植，生下轉(zhuǎn)基因牛犢．
故答案為：
（1）2或0    同種限制酶切割形成的末端相同，部分目的基因與質(zhì)粒反向連接
（2）輸卵管    獲能
（3）體外受精

點(diǎn)評(píng) 本題考查了基因工程、胚胎工程的相關(guān)內(nèi)容，意在考查考生理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，掌握相關(guān)的操作技能，并能將這些實(shí)驗(yàn)涉及的方法和技能進(jìn)行綜合運(yùn)用．