Question

 基因敲除是應用DNA重組原理發展起來的一門新興技術�！盎�因敲除細胞”的構建過程如下：

第一步：從小鼠囊胚中分離出胚胎干細胞（ES），在培養基中擴增。這些細胞中需要改造的基因稱為“靶基因”。

第二步：構建基因表達載體。取與靶基因序列同源的目的基因（同源臂），在同源臂上接入neoR（新霉素抵抗基因）等。由于同源臂與靶基因的DNA正好配對，所以能將表達載體準確地帶到靶基因的位置。

第三步：將表達載體導入胚胎干細胞，并與其內靶基因同源重組，完成胚胎干細胞的基因改造。

第四步：基因改造后的胚胎干細胞增殖、篩選�；�本原理如下圖所示。

請根據上述資料，回答下列問題：

（1）在把與靶基因序列同源的目的基因導入受體細胞前，應首先完成              ，在這過程中所需要的工具酶是                              。

（2）如果要獲得一只含目的基因的小鼠，則選擇的受體細胞通常是            。若用大腸桿菌儲存目的基因，則需先將其處理為             細胞。

（3）上述資料中neoR基因的作用最可能是                               。

（4）（2）中獲得的小鼠，通過有性生殖產生的后代是否都含該目的基因？       。為什么?             。

Answer 1

（1）表達載體的構建    限制性核酸內切酶（答限制酶也給分）和DNA連接酶

（2）受精卵            感受態

（3）作為標志基因，便于篩選

（4）否      在形成生殖細胞時等位基因（目的基因和靶基因）會發生分離