基因敲除是應用DNA重組原理發展起來的一門新興技術。通常意義上的基因敲除主要是應用DNA重組原理，用設計好的DNA片段替代動物細胞內的基因片段，從而達到基因敲除的目的。在后基因組時代，研究的重點是利用轉基因動物或基因敲除的動物研究基因的功能，運用基因重組進行基因敲除依然是構建基因敲除動物模型中最普遍的使用方法，其基本原理如下圖所示。請回答下列問題：
（1）在把目的基因導入受體細胞前，應選擇一個合適的 與之結合，在這一過程中所需要的工具酶是限制性內切酶和 。
（2）如果要獲得一只含目的基因的小鼠，則一般是通過病毒感染或顯微注射技術將目的基因導入受體細胞，選擇的受體細胞應該是 。
（3）在此類基因操作中，通常可以用水母的發光蛋白作為標記物。水母發光蛋白有發光環，能在一定條件下發出熒光，現已將這種蛋白質的基因作為生物轉基因的標記，在轉基因技術中，這種蛋白質的作用是（ ）
| A．促使目的基因導入受體細胞中 | B．促使目的基因在寄主細胞中復制 |
| C．使目的基因的轉移容易被檢測出來 | D．使目的基因容易表達成功 |
科目：高中生物 來源：湖南省長郡中學2009—2010學年下學期高二學業水平模擬考試（理綜）生物部分 題型：綜合題
（15分）基因敲除是應用DNA重組原理發展起來的一門新興技術。“基因敲除細胞”構建過程如下：
第一步：從小鼠囊胚中分離出胚胎干細胞（ES），在培養基中擴增。這些細胞中需要改造的基因稱為“靶基因”。
第二步：構建基因表達載體。取與靶基因序列同源的目的基因（同源臂），在同源臂上接入neoR（新霉素抵抗基因）等。由
于同源臂與靶基因的DNA正好配對，所以能像“準星”一樣，將表達載體準確地帶到靶基因的位置。
第三步：將表達載體導入胚胎干細胞，并與其內靶基因同源重組，完成胚胎干細胞的基因改造。
第四步：基因改造后的胚胎干細胞增殖、篩選。
請根據上述資料，回答下列問題：
（1）在把與靶基因序列同源的目的基因導入受體細胞前，應首先完成 。
（2）如果要獲得一只含目的基因的小鼠，則選擇的受體細胞通常是 ；若用大腸桿菌儲存目的基因，則需先將其處理為 細胞。
（3）上述資料中neoR基因的作用最可能是 。
（4）獲得的小鼠，通過有性生殖產生的后代是否都含該目的基因 。
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科目：高中生物 來源：湖南省2009—2010學年下學期高二學業水平模擬考試（理綜）生物部分 題型：綜合題
（15分）基因敲除是應用DNA重組原理發展起來的一門新興技術。“基因敲除細胞”構建過程如下：
第一步：從小鼠囊胚中分離出胚胎干細胞（ES），在培養基中擴增。這些細胞中需要改造的基因稱為“靶基因”。
第二步：構建基因表達載體。取與靶基因序列同源的目的基因（同源臂），在同源臂上接入neoR（新霉素抵抗基因）等。由于同源臂與靶基因的DNA正好配對，所以能像“準星”一樣， 將表達載體準確地帶到靶基因的位置。
第三步：將表達載體導入胚胎干細胞，并與其內靶基因同源重組，完成胚胎干細胞的基因改造。
第四步：基因改造后的胚胎干細胞增殖、篩選。
請根據上述資料，回答下列問題：
（1）在把與靶基因序列同源的目的基因導入受體細胞前，應首先完成 。
（2）如果要獲得一只含目的基因的小鼠，則選擇的受體細胞通常是 ；若用大腸桿菌儲存目的基因，則需先將其處理為 細胞。
（3）上述資料中neoR基因的作用最可能是 。
（4）獲得的小鼠，通過有性生殖產生的后代是否都含該目的基因 。
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科目：高中生物 來源：2010～2011學年湖北省高二下學期期中考試生物試卷 題型：綜合題
基因敲除是應用DNA重組原理發展起來的一門新興技術。通常意義上的基因敲除主要是應用DNA重組原理，用設計好的DNA片段替代動物細胞內的基因片段，從而達到基因敲除的目的。在后基因組時代，研究的重點是利用轉基因動物或基因敲除的動物研究基因的功能，運用基因重組進行基因敲除依然是構建基因敲除動物模型中最普遍的使用方法，其基本原理如下圖所示。請回答下列問題：
（1）在把目的基因導入受體細胞前，應選擇一個合適的 與之結合，在這一過程中所需要的工具酶是限制性內切酶和 。
（2）如果要獲得一只含目的基因的小鼠，則一般是通過病毒感染或顯微注射技術將目的基因導入受體細胞，選擇的受體細胞應該是 。
（3）在此類基因操作中，通常可以用水母的發光蛋白作為標記物。水母發光蛋白有發光環，能在一定條件下發出熒光，現已將這種蛋白質的基因作為生物轉基因的標記，在轉基因技術中，這種蛋白質的作用是（ ）
A．促使目的基因導入受體細胞中 B．促使目的基因在寄主細胞中復制
C．使目的基因的轉移容易被檢測出來 D．使目的基因容易表達成功
（4）按上述操作獲得的轉基因小鼠是雜合子，如果想獲得一個目的基因純合的個體，以研究該種動物體內靶基因的功能，應該如何進行下一步實驗？
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科目：高中生物 來源：2010～2011學年吉林省高二下學期第一次月考生物試卷 題型：綜合題
基因敲除是應用DNA重組原理發展起來的一門新興技術。通常意義上的基因敲除主要是應用DNA重組原理，用設計好的DNA片段替代動物細胞內的基因片段，從而達到基因敲除的目的。在后基因組時代，研究的重點是利用轉基因動物或基因敲除的動物研究基因的功能，運用基因重組進行基因敲除依然是構建基因敲除動物模型中最普遍的使用方法，其基本原理如下圖所示。請回答下列問題：
（1）在把目的基因導入受體細胞前，應選擇一個合適的 與之結合，在這一過程中所需要的工具酶是限制性內切酶和 。
（2）如果要獲得一只含目的基因的小鼠，則一般是通過病毒感染或顯微注射技術將目的基因導入受體細胞，選擇的受體細胞應該是 。
（3）在此類基因操作中，通常可以用水母的發光蛋白作為標記物。水母發光蛋白有發光環，能在一定條件下發出熒光，現已將這種蛋白質的基因作為生物轉基因的標記，在轉基因技術中，這種蛋白質的作用是（ ）
A．促使目的基因導入受體細胞中 B．促使目的基因在寄主細胞中復制
C．使目的基因的轉移容易被檢測出來 D．使目的基因容易表達成功
（4）按上述操作獲得的轉基因小鼠是雜合子，如果想獲得一個目的基因純合的個體，以研究該種動物體內靶基因的功能，應該如何進行下一步實驗？
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