Question

6．飼養動物常用的植物飼料中含有難溶的植酸鈣等物質，很難被動物吸收利用，還影響對其他營養物質的利用?若在飼料中添加植酸酶，則能催化其水解成為可以吸收利用的磷酸鹽等?以下是科研人員從作物根部土壤中分離產植酸酶的菌株的過程示意圖?請分析作答?

（1）培養基中除了添加植酸鈣以外，應含有碳源、氮源、水、無機鹽等基本營養物質?
（2）為防止雜菌污染，要對培養基和培養皿等進行滅菌?接種后須將培養皿呈倒置狀態放置?
（3）接種以前要進行的一系列操作，目的是在固體培養基表面形成單個菌落?根據土壤樣品的稀釋倍數和接種稀釋液的體積，統計平板上的菌落數就能大致推測出樣品中的活菌數?通常每種稀釋液需涂布3個平板，取其平均值?若將最后一個試管中的菌液每次吸取0.1mL涂布培養后獲得平均值是C，則1g土壤中含有此菌的菌株數是C×10⁶?
（4）若要對上述菌株進行純化，通常使用的劃線工具是接種環；接種時，在第一區域劃線后須將該工具灼燒、冷卻后再劃線，在第二次劃線時須從第一次劃線的末端開始，這樣做的目的是從上一區域獲得菌種．
（5）產植酸酶的菌株會水解植酸鈣，菌落的周圍將形成透明的區域，根據透明區域的有無，可初步判斷該菌是否產植酸酶?實驗結果顯示A～E五種菌株中，E是產植酸酶最理想的菌株?

Answer 1

分析 稀釋平板法在培養基上分離、培養出微生物的單個菌落，以便于計數、移植、分離，從而達到純培養的目的．選擇培養基是在培養基中加入某種化學物質，以抑制不需要的微生物的生長，促進所需要的微生物的生長．由于植酸鈣的不溶解性，使培養基中形成白色渾濁．產植酸酶的菌株會水解植酸鈣，菌落的周圍將形成透明的區域，根據透明區域的有無，可初步判斷該菌是否產植酸酶．在微生物實驗操作中，防止雜菌污染時貫穿實驗整個過程中．計算菌種數時，關注稀釋的倍數．

解答 解：（1）從作物根部土壤中分離產植酸酶的菌株需要使用含植酸鈣的選擇培養基，培養基中應含有碳源、氮源、水、無機鹽等基本營養物質?
（2）為防止雜菌污染，要對培養基和培養皿等進行滅菌處理，接種后需要將培養皿倒置培養．
（3）接種以前要進行的一系列操作，即稀釋平板法培養出微生物的單個菌落，達到純培養的目的．稀釋涂布平板法進行微生物的計數突觸需要至少3個平板統計平板上的菌落數取其平均值．最后一個試管中的菌液每次吸取0.1mL涂布培養后獲得平均值是C則1g土壤中含有活菌數為C×10×10³×10²═C×10⁶?
（4）題干中的接種過程中用到的接種工具是接種環．接種時，在第一區域劃線后須將接種環灼燒、冷卻后再劃線．
（5）由于植酸鈣的不溶解性，使培養基中形成白色渾濁．產植酸酶的菌株會水解植酸鈣，菌落的周圍將形成透明的區域．根據透明區域的有無，可初步判斷該菌是否產植酸酶．故圖中E是產植酸酶最理想的菌株?
故答案為：
（1）植酸鈣
（2）滅菌    倒置
（3）單個菌落  菌落數  3  C×10⁶
（4）接種環   灼燒、冷卻
（5）E

點評 本題綜合微生物的培養及實驗設計和分析能力，意在考查考生能理解所學知識的要點，把握知識間的內在聯系的能力；能運用所學知識與觀點，對實驗現象和結果進行解釋、分析、處理．