Question

有機磷化合物在農業生產中作為殺蟲劑被廣泛使用，長期以來因使用其量大、范圍廣，容易造成水體污染等諸多環境問題．
（1）為了篩選甲胺磷的降解細菌，將農藥廠的甲胺磷污染土壤懸液涂布在

 

固體培養基上進行培養，可以對降解菌進行定向的

 

．
（2）在分離得到的菌株A中檢測到了ophc2蛋白，可以催化甲胺磷的降解，這種蛋白質是在細胞的

 

上合成的．若要定量分析ophc2蛋白的催化能力，應測定單位時間內

 

．
（3）為了測定菌株A降解效率，配置0mg/L、10mg/L、30mg/L、50mg/L、70mg/L的甲胺磷溶液，測定不同濃度甲胺磷溶液的吸光值，畫出標準曲線，得到吸光值與甲胺磷濃度的關系：y=0.02x-0.01，如圖所示．
將含有100mg/L甲胺磷的菌株A培養液分別在不同溫度下培養5天后，測定吸光值，結果如下表所示，已知降解率=（初始甲胺磷濃度-降解后甲胺磷濃度）/初始甲胺磷濃度，則取得的最大降解率等于

 

（忽略細菌對吸光值的影響和培養液體積變化），若甲胺磷自身化學分解，則計算的降解率數值會

 

（偏大、不變、偏小）．

溫度	15℃	20℃	25℃	30℃	35℃	40℃
吸光值（菌株A）	1.71	1.53	1.15	0.49	1.32	1.89

（4）繼續分析細菌的16S rDNA可以鑒定種類，提取得到菌株A的DNA后，通過

 

擴增得到大量的16S rDNA，進而對細菌分類．
（5）導入ophc2基因的煙草可獲得降解有機磷的能力，煙草花粉的遺傳物質存在于細胞核和線粒體中，為了避免轉基因煙草的花粉對野生型煙草造成基因污染，可將ophc2基因導入煙草細胞的

 

中．

Answer 1

考點：微生物的分離和培養

專題：

分析：閱讀題干和題圖可知，本題是甲胺磷的降解細菌的選擇培養與應用相結合的綜合性題目，涉及的知識點 較多，可以根據每一小問題涉及的具體內容梳理相關知識點進行分析解答．

解答： 解；（1）由題意可知，篩選甲胺磷的降解細菌，可以用以甲胺磷為唯一碳源（氮源）的培養基，這樣只有能分解甲胺磷的微生物生長，其他微生物因缺乏碳源（氮源）而不能生長．
（2）蛋白質合成的場所是核糖體；測定酶活性的方法是單位時間內反應物的減少量或生成物的增加量，由于題目中不知道甲胺磷降解的產物是什么，所以只能用單位時間內甲胺磷的減少量來表示酶的活性大�。�
（3）由不同濃度甲胺磷溶液的吸光值的標準曲線可知，吸光值越大，對于的甲胺磷溶液的濃度越大，對于表格中的數據來說，吸光值越大，甲胺磷被降解的越少，所以細菌對甲胺磷降解率高的對應的吸光值小，因此吸光值在0.49時降解率最大=100-25/100=75%；如果甲胺磷自身也會分解，則計算的降解率數值會偏大．
（4）擴增菌株A的DNA可以用PCR技術．
（5）為了避免轉基因煙草的花粉對野生型煙草造成基因污染，可將ophc2基因導入煙草細胞葉綠體中．
故答案應為：
（1）以甲胺磷為唯一碳源（氮源）       選擇                   （2）核糖體        甲胺磷的降解量
（3）75%       偏大                   （4）PCR               （5）葉綠體

點評：本題的知識點是選擇培養基的選擇作用，核糖體的功能，根據標準吸光值計算降解率，PCR技術的應用等，主要考查學生對實驗數據的分析處理能力和運用所學的知識 綜合解決問題的能力．