Question

【題目】請回答下列與基因工程有關的問題。

（1）在基因工程中，獲取目的基因主要有兩大途徑，即____________和從____________中分離。

（2）基因工程的核心步驟是構建基因表達載體，構建基因表達載體需要用的工具酶是____________。在已經構建的基因表達載體中，調控目的基因表達的序列有____________；用于對目的基因進行篩選的序列為_____________。

（3）在獲得目的基因后，可以采用PCR技術擴增目的基因，該技術的前提是____________，以便根據這一序列合成引物。PCR技術中所利用的關鍵酶是____________。

（4）尼倫伯格、馬太破譯了編碼氨基酸的第一個遺傳密碼，如果說他們的工作為基因的分離和合成提供了啟示，那么這一啟示是_____________。

Answer 1

【答案】人工合成??? 自然界已有的物種??? 限制酶和DNA連接酶??? 啟動子和終止子??? 標記基因??? 要有一段已知目的基因的核苷酸序列??? 熱穩定DNA聚合酶（Taq酶）??? 自然界中從微生物到人類共用一套密碼子???

【解析】

基因工程技術的基本步驟：

（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成。

（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。

（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因——DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA——分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質——抗原-抗體雜交技術。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

（1）目的基因的獲取方法主要是人工合成和從基因文庫中獲取即從自然界已有的物種中分離。

（2）基因工程的核心步驟是構建基因表達載體，其中用到的工具酶是限制酶剪切DNA片段，DNA連接酶鏈接DNA片段；基因表達載體上包含的元件有復制原點、目的基因、啟動子、終止子和標記基因等，其中調控目的基因表達的序列有啟動子和終止子，對目的基因進行篩選的序列是標記基因。

（3）PCR技術的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列；其中用到的關鍵酶是熱穩定DNA聚合酶。

（4）尼倫伯格、馬太破譯了編碼氨基酸的第一個遺傳密碼，他們的工作為基因的分離和合成提供的啟示是自然界中從微生物到人類共用一套密碼子。