Question

【題目】在植物的生態環境中，存在著各種各樣的微生物，它們有的附著于植物表面，有的則生活于植物體內。有資料顯示，一些植物內生微生物與宿主發生關聯時，可明顯增強宿主的抗病性，提高植物的生產力．以下為從菠菜葉中分離內生細菌，篩選出對菠菜枯萎病菌有拮抗作用的菌株的過程。

（步驟一 菠菜葉內生細菌的分裂）

（1）取0.1g菠菜葉，經70%酒精和0.2%升汞進行消毒后，接種于培養基上．培養48h后，沒有觀察到菌落．這說明_____．

A．菠菜葉表面微生物已被殺死 B．菠菜葉內在微生物已被殺死

C．菠菜葉內不存在內在細菌 D．菠菜葉細胞已被全部殺死

（2）將上述0.1g菠菜葉放入無菌研缽中，加入一定量的水，研磨成勻漿．此過程中的水應是_____。

A．蒸餾水 B．自來水 C．無菌水 D．純凈水

（3）將菠菜葉研磨液接種至培養基上，30℃黑暗培養48h獲得菌落．為進一步獲得單菌落，挑出形態大小有差異的菌落，可采用_____法接種在_____培養基上純化培養。

（步驟二 菠菜枯萎病毒拮抗菌株的篩選）

（4）在平板培養基中央接種入菠菜枯萎病菌菌塊，在四個點各接種入一小環單菌落菌株，同時設置對照，如圖.28℃黑暗培養3d，觀察發現對照平板上長滿菠菜枯萎病菌，而實驗平板上的單菌落菌株周圍出現透明圈．此現象說明_____。

（步驟三 菠菜葉內生細菌種類的鑒定）

（5）對單菌落菌株進行生理生化鑒定，確定菌種為一種芽孢桿菌．以下可能是該菌種特征的是_____．

A．有菌蓋 B．有質膜 C．能形成莢膜 D．嚴格厭氧 E．可能存在抗利福平基因

Answer 1

【答案】A C 劃線法 固體 單菌落菌株對菠菜枯萎病菌有拮抗作用 BCE

【解析】

菌落是由單個細菌（或其他微生物）細胞或一堆同種細胞在適宜固體培養基表面或內部生長繁殖到一定程度，形成肉眼可見的子細胞群落；因為每一種細菌在一定條件下形成固定的菌落特征，包括菌落的大小、形狀、邊緣、光澤、質地、顏色和透明程度等。不同種或同種在不同的培養條件下，菌落特征是不同的。

（1）根據題意可知培養48h后，沒有觀察到菌落，說明經70%酒精和0.2%升汞進行消毒后，菠菜葉表面微生物已被殺死了。

故選A。

（2）為了控制無菌條件，應該用無菌水。

故選C。

（3）為進一步獲得單菌落，一般采用在固體培養基進行平板劃線法的接種方法。

（4）在實驗平板上的單菌落菌株周圍出現透明圈說明了單菌落菌株對菠菜枯萎病菌有拮抗作用。

（5）芽孢桿菌有質膜；能形成莢膜；可能存在抗利福平基因，具有抗利福平的能力。

故選BCE。