Question

利用相關工程技術可以獲得抗黑腐病雜種黑芥-花椰菜植株，已知野生黑芥具有黑腐病的抗性基因，而花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，技術人員用一定劑量的紫外線處理黑芥原生質體可使其染色體片段化，并喪失再生能力，再利用此原生質體作為部分遺傳物質的供體與完整的花椰菜原生質體融合，流程如圖．

據圖回答下列問題：
（1）該過程用到的工程技術有

 

和

 

．
（2）過程①所需的酶是

 

，過程②PEG的作用是

 

，經過②操作后，需篩選出融合的雜種細胞，顯微鏡下觀察融合的活細胞中有供體的葉綠體存在可作為初步篩選雜種細胞的標志．
（3）原生質體培養液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持一定的滲透壓，其作用是

 

．原生質體經過細胞壁再生，進而分裂和脫分化形成

 

．
（4）若分析再生植株的染色體變異類型，應剪取再生植株和雙親植株的根尖，制成裝片，然后在顯微鏡下觀察比較染色體的

 

；對雜種植株進行

 

接種實驗，可篩選出具有高抗性的雜種植株．

Answer 1

考點：植物體細胞雜交的過程,植物組織培養的概念及原理,植物培養的條件及過程

專題：

分析：植物體細胞雜交過程中使用的植物細胞工程技術有植物體細胞雜交和植物組織培養；在植物體細胞雜交過程中，先用纖維素酶和果膠酶去掉細胞壁，獲得的原生質體處于適宜濃度的等滲溶液中，保持原生質體完整性，避免失水或吸水；由于染色體在顯微鏡下能看見，因此可以觀察染色體的形態和數目確定是否發生染色體變異；對雜種植物進行鑒定最簡單的方法是從個體水平上進行檢測，根據分析回答．

解答： 解：（1）據圖可知，該流程圖表示先去掉兩種植物細胞的細胞壁，然后誘導融合獲得雜種細胞，通過植物組織培養獲得雜種植株，該過程是植物體細胞雜交．
（2）植物細胞細胞壁的成分是纖維素和果膠，因此采用纖維素酶和果膠酶去掉植物細胞的細胞壁；聚乙二醇（PEG）的作用是讓原生質體融合．
（3）去掉細胞壁后獲得的原生質體需要放在適宜濃度的甘露醇溶液中，保持原生質體完整性，避免失水或吸水；在植物組織培養中，經過脫分化后形成愈傷組織．
（4）由于染色體在顯微鏡下能看見，因此可以制作臨時裝片，觀察染色體的形態和數目，以確定是否發生染色體變異；對雜種植物進行鑒定最簡單的方法是從個體水平上進行檢測，即接種黑腐病菌，觀察植物的性狀．
故答案為：
（1）植物體細胞雜交  植物組織培養
（2）纖維素酶和果膠酶    促進原生質體的融合 
（3）保持原生質體完整性   愈傷組織  
（4）形態和數目  黑腐病菌

點評：本題主要考查植物體細胞雜交過程，需要學生對相應的基礎知識要熟練掌握且具有一定的識圖、圖文轉化的能力．