Question

15．如圖為單克隆抗體制備流程示意圖 請據圖分析．

（1）圖中過程①表示注射特定抗原，雜交瘤細胞的特點是既能無限增殖，又能產生特異性抗體．
（2）促進圖中兩種細胞融合最常用的方法是滅活的病毒，過程②只考慮細胞的兩兩融合，則可能會出現3種細胞，圖中用HAT培養基培養的目的是篩選出雜交瘤細胞．
（3）為選育出能產生高特異性抗體的細胞，要將從HAT培養基上篩選出的細胞稀釋到7-10分細胞/mL，在每個培養孔滴入0.1mL細胞稀釋液，其目的是使每個孔內不多于一個細胞，達到單克隆培養的目的（或單一細胞培養以保證抗體的純度）．
（4）通過⑤可獲得大量的單克隆抗體，在培養瓶要控制一定的CO₂濃度，原因是維持培養液的pH，此外還可以通過[④]小鼠腹腔內培養法獲得單克隆抗體．
（5）若用¹⁵N標記的氨基酸培養能產生單克隆抗體的細胞，放射性物質在細胞器中出現的先后順序是核糖體、內質網、高爾基體．

Answer 1

分析 1、單克隆抗體制備技術是動物細胞融合技術的應用之一，其基礎是動物細胞培養．在制備單克隆抗體時，利用選擇性培養基培養細胞，篩選得到雜交瘤細胞（去掉未雜交的細胞以及自身融合的細胞）．單克隆抗體是由單個B淋巴細胞進行無性繁殖形成的細胞系所產生出的化學性質單一、特異性強的抗體．
2、據圖分析，①過程是將特定的抗原注射小鼠，篩選出產生抗體的B淋巴細胞；②過程是誘導細胞融合；③過程是篩選出雜交瘤細胞：B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合，轉移到HAT培養基中培養，未融合的細胞死亡，而雜交瘤細胞存活；④過程是通過小鼠腹腔中培養獲得大量的單克隆抗體；⑤過程是培養液中培養獲得大量的單克隆抗體．

解答 解：（1）圖中過程①表示注射特定抗原，獲得免疫的B淋巴細胞．雜交瘤細胞具有骨髓瘤細胞和效應B細胞的特點，既能無限增殖，又能產生特異性抗體．
（2）促進圖中兩種動物細胞融合最常用的方法是滅活的病毒，過程②只考慮細胞的兩兩融合，則可能會出現3種細胞：骨髓瘤細胞自身融合的細胞、效應B細胞自身融合的細胞、雜交瘤細胞，圖中用HAT培養基培養的目的是篩選出雜交瘤細胞．
（3）為選育出能產生高特異性抗體的細胞，要將從HAT培養基上篩選出的細胞稀釋到7～10個細胞/ml，每孔滴入0.1ml細胞稀釋液，其目的是使每個孔內不多于一個細胞，達到單克隆培養的目的（或單一細胞培養以保證抗體的純度）．
（4）通過⑤培養液中培養可獲得大量的單克隆抗體，在培養瓶要控制一定的CO₂濃度，原因是CO₂能維持培養液的pH，此外還可以通過④小鼠腹腔內培養獲得單克隆抗體．
（5）若用¹⁵N標記的氨基酸培養能產生單克隆抗體的細胞，單克隆抗體是分泌蛋白質，首先在核糖體中合成，在內質網上初步加工，之后內質網邊緣以“出芽”形式冒出囊泡，囊泡離開內質網，轉移到高爾基體上，與高爾基體膜融合，囊泡中的物質也進入到高爾基體中，在高爾基體中進一步加工成成熟的蛋白質，高爾基體膜也突起形成小泡，小泡離開高爾基體，轉移到細胞膜上，小泡中物質釋放到細胞膜外．因此放射性物質在細胞器中出現的先后順序是核糖體、內質網、高爾基體．
故答案為：
（1）注射特定抗原        既能無限增殖，又能產生特異性抗體
（2）滅活的病毒         3      雜交瘤細胞
（3）使每個孔內不多于一個細胞，達到單克隆培養的目的（或單一細胞培養以保證抗體的純度）
（4）維持培養液的pH       小鼠腹腔內培養
（5）核糖體、內質網、高爾基體

點評 本題以單克隆抗體制備流程階段示意圖為載體，考查單克隆抗體制備的過程，動物細胞培養的條件，意在考查考生的識記能力和理解所學知識要點，把握知識間內在聯系的能力；能運用所學知識，對生物學問題作出準確的判斷，難度適中．