Question

綠色熒光蛋白GFP能在藍光或紫外光的激發下發出熒光，這樣借助GFP發出的熒光就可以跟蹤蛋白質在細胞內部的移動情況，幫助推斷蛋白質的功能。下圖為我國首例綠色熒光蛋白（GFP）轉基因克隆豬的培育過程示意圖，據圖回答：

（1）若限制酶Ⅰ的識別序列和切點是—G^↓GATCC—，限制酶Ⅱ的識別序列和切點是—^↓GATC—，在質粒上有酶Ⅰ的一個切點，在目的基因的兩側各有1個酶Ⅱ的切點，在DNA連接酶的作用下，上述兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端能否連接起來__________，理由是： ___________________________________________。

（2）過程③將重組質粒導入豬胎兒成纖維細胞時，采用最多的方法是______________________。

（3）獲得轉基因豬的關鍵步驟是_____（填序號），GFP基因的作用是作為_______。抑制小豬抗原表達的基因要插入到啟動子和_________之間。獲得的轉基因克隆豬，可以解決的醫學難題是可以避免     _____________________。

（4）目前科學家們通過蛋白質工程制造出了藍色熒光蛋白，黃色熒光蛋白等，采用蛋白質工程技術制造出藍色熒光蛋白過程的正確順序是：_____________________（用數字表示）。

①推測藍色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸

②藍色熒光蛋白的功能分析和結構設計序列

③藍色熒光蛋白基因的修飾（合成）  

④表達出藍色熒光蛋白。

Answer 1

（1）可以連接(1分) 因為由兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端是相同的（或是可以互補的）

（2）顯微注射技術

（3）②     作為標記基因     終止子      器官移植時發生免疫排斥反應

（4）②①③④