Question

孔雀石綠（C₂₃H₂₅N₂Cl）常用作紡織業的染料，也可用作水產養殖業的殺菌驅蟲劑．但它具有高毒性、高殘留的危害，因此對孔雀石綠廢水的處理已成為環境科學領域關注的熱點．科研人員從某化工廠污水池中分離獲得了能降解孔雀石綠的細菌菌株A．主要步驟如圖1所示．

分析并回答：
（1）從①到③的培養過程中培養液應加入

 

作為唯一碳源，此過程的目的是

 

和

 

．
（2）使用

 

法可以在④上獲得單個菌落．
（3）若要對獲得的菌株A進行分類鑒定，可先利用

 

技術進行體外DNA擴增，此過程中采用

 

方法將DNA雙鏈解開，而在菌株A體內，DNA復制時將雙鏈解開則是在

 

的作用下完成的．
（4）研究人員進一步研究了不同金屬離子對菌株A降解孔雀石綠的影響，實驗結果如圖2．
由上述結果可以看出，與不加金屬離子的對照組相比，多數金屬離子對菌株A降解孔雀石綠有

 

作用，唯有Pb²⁺的作用相反．若要排除Pb²⁺本身對孔雀石綠有降解作用，則應設置

 

的培養基樣本作為對照．

Answer 1

考點：培養基對微生物的選擇作用,微生物的分離和培養,PCR技術的基本操作和應用

專題：

分析：培養基的營養構成：各種培養基一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽．分為液體培養基和固體培養基．接種方法：平板劃線法和稀釋涂布法．

解答： 解：（1）根據題意分析可知，科研人員從某化工廠污水池中分離獲得了能降解孔雀石綠的細菌菌株A，所以從①到③的培養過程中培養液應加入孔雀石綠作為唯一碳源，此過程的目的是篩選出菌株A和增加菌株A的濃度（擴大培養）． 
（2）使用稀釋涂布平板（或平板劃線）法接種可以在④上獲得單個菌落．
（3）若要對獲得的菌株A進行分類鑒定，可先利用PCR技術進行體外DNA擴增，此過程中采用控制溫度方法將DNA雙鏈解開，即高溫解鏈；而在菌株A體內，DNA復制時將雙鏈解開則是在解旋酶的作用下完成的．
（4）由圖分析可知，與不加金屬離子的對照組相比，多數金屬離子對菌株A降解孔雀石綠有抑制作用，唯有Pb²⁺的作用相反．若要排除Pb²⁺本身對孔雀石綠有降解作用，則應設置含等量的Pb²⁺但不接種菌株的培養基樣本作為對照．
故答案為：
（1）孔雀石綠     篩選出菌株A     增加菌株A的濃度（擴大培養）
（2）稀釋涂布平板（或平板劃線）
（3）PCR    控制溫度  解旋酶
（4）抑制  含等量的Pb²⁺但不接種菌株A

點評：本題主要考查微生物的利用、微生物的分離和培養的相關知識，要求考生能夠識記微生物分離與純化的方法；識記PCR技術的過程和原理，能夠與體內DNA復制進行比較；能夠根據題圖獲得有效解題信息，難度適中．