Question

10．無菌技術常使用高壓蒸汽滅菌鍋進行滅菌，其使用的正確操作順序是（　　）
①加水 ②排冷氣 ③裝置滅菌物品 ④100kPa下滅菌  ⑤加蓋 ⑥排氣至0KPa后，打開滅菌鍋．

• A． ①③⑤②④⑥
• B． ②③⑤①④⑥
• C． ①②④⑤③⑥
• D． ②⑤①⑥④③

Answer 1

分析 1、高壓滅菌的原理是：在密閉的蒸鍋內，其中的蒸汽不能外溢，壓力不斷上升，使水的沸點不斷提高，從而鍋內溫度也隨之增加．在0.1MPa的壓力下，鍋內溫度達121℃．在此蒸汽溫度下，可以很快殺死各種細菌及其高度耐熱的芽孢．
2、注意：完全排除鍋內空氣，使鍋內全部是水蒸氣，滅菌才能徹底．高壓滅菌放氣有幾種不同的做法，但目的都是要排凈空氣，使鍋內均勻升溫，保證滅菌徹底．
3、操作步驟：（1）首先將內層滅菌桶取出，再向外層鍋內加入適量的水，使水面與三角擱架相平為宜．
（2）放回滅菌桶，并裝入待滅菌物品．注意不要裝得太擠，以免防礙蒸汽流通而影響滅菌效果．三角燒瓶與試管口端均不要與桶壁接觸，以免冷凝水淋濕包口的紙而透入棉塞．
（3）加蓋，并將蓋上的排氣軟管插入內層滅菌桶的排氣槽內．再以兩兩對稱的方式同時旋緊相對的兩個螺栓，使螺栓松緊一致，勿使漏氣．
（4）用電爐或煤氣加熱，并同時打開排氣閥，使水沸騰以排除鍋內的冷空氣．待冷空氣完全排盡后，關上排氣閥，讓鍋內的溫度隨蒸汽壓力增加而逐漸上升．當鍋內壓力升到所需壓力時，控制熱源，維持壓力至所需時間．本實驗用 1.05kg/cm2，121.3℃，20分鐘滅菌．
（5）滅菌所需時間到后，切斷電源或關閉煤氣，讓滅菌鍋內溫度自然下降，當壓力表的壓力降至0時，打開排氣閥，旋松螺栓，打開蓋子，取出滅菌物品．如果壓力未降到0時，打開排氣閥，就會因鍋內壓力突然下降，使容器內的培養基由于內外壓力不平衡而沖出燒瓶口或試管口，造成棉塞沾染培養基而發生污染．
（6）將取出的滅菌培養基放入 37℃溫箱培養24小時，經檢查若無雜菌生長，即可待用．

解答 解：高壓蒸汽鍋滅菌的操作步驟：
（1）首先將內層滅菌桶取出，再向外層鍋內加入適量的水，使水面與三角擱架相平為宜．
（2）放回滅菌桶，并裝入待滅菌物品．
（3）加蓋，并將蓋上的排氣軟管插入內層滅菌桶的排氣槽內．
（4）用電爐或煤氣加熱，并同時打開排氣閥，使水沸騰以排除鍋內的冷空氣．
（5）滅菌所需時間到后，切斷電源或關閉煤氣，讓滅菌鍋內溫度自然下降，當壓力表的壓力降至0時，打開排氣閥，旋松螺栓，打開蓋子，取出滅菌物品．如果壓力未降到0時，打開排氣閥，就會因鍋內壓力突然下降，使容器內的培養基由于內外壓力不平衡而沖出燒瓶口或試管口，造成棉塞沾染培養基而發生污染．
（6）將取出的滅菌培養基放入37℃溫箱培養24小時，經檢查若無雜菌生長，即可待用．
故選：A．

點評 本題考查微生物的分離和培養，重點考查無菌技術，只有考試識記高壓蒸汽滅菌的具體操作步驟即可正確答題，屬于考綱識記層次的考查．