Question

17．尿素是一種高濃度氮肥且長期施用沒有不良影響，但尿素只有通過土壤中某些細菌分解為氨后，才能被植物吸收利用．分解尿素的細菌都能合成脲酶，脲酶能催化尿素水解．某同學要分離土壤中能分解尿素的細菌，并統計每克土壤樣品中活菌數目，培養基配方如下：

KH2PO4	Na2HPO4	MgSO4•7H2O	蛋白胨	葡萄糖	尿素	瓊脂
1.4g	2.1g	0.2g	1.0g	10.0g	1.0g	15.0g

（1）根據培養基的成分判斷，該同學能否分離出土壤中分解尿素的細菌？不能（能/不能），原因是培養基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源，不能選擇出只分解尿素為氮源的微生物．
（2）下列材料或用具中：①培養細菌用的培養基與培養皿；②玻棒、試管、錐形瓶和吸管；③實驗操作者的雙手．需要滅菌的是：①和②；需要消毒的是：③．（填序號）
（3）要統計每克土壤樣品中活菌數目，宜采用稀釋涂布平板法接種，根據土壤樣品的稀釋倍數和接種稀釋液的體積，統計平板上的菌落數目 就能大約推測出樣品中活菌數．
（4）該同學設想：由活性脲酶和尿素混合，制成“加酶尿素”，尿素肥效一定更高．為了提高“加酶尿素“中脲酶的利用率，應當采用酶的固定化技術．

Answer 1

分析 1、選擇培養基的概念是：在微生物學中，將允許特定微生物種類生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養基，稱為選擇培養基，由于分解尿素的細菌都能合成脲酶，脲酶能催化尿素水解，因此在以尿素為唯一氮源的培養基上，分解尿素的菌能以尿素為氮源生長，而不能分解尿素的菌因缺乏氮源而無法生長．
2、常用的接種微生物的方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法，稀釋涂布平板法是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液涂布到固體瓊脂培養基上，進行培養，在稀釋度足夠高的菌液里，將聚集在一起的微生物分散成單個細胞，獲得由單個細胞繁殖而來的菌落．

解答 解：（1）尿素分解菌所需要的氮源是尿素，據表分析，表中的蛋白胨可以為微生物的生存提供氮源，所以不能分離尿素分解菌，篩選纖維素分解菌需要以纖維素為唯一的碳源的選擇培養基．
（2）①培養細菌用的培養基與培養皿和②玻棒、試管、錐形瓶和吸管需要滅菌處理，而③實驗操作者的雙手只需要消毒．
（3）要統計每克土壤樣品中活菌數目，宜采用稀釋涂布平板法接種，根據土壤樣品的稀釋倍數和接種稀釋液的體積，統計平板上的菌落數目 就能大約推測出樣品中活菌數．
（4）為了提高“加酶尿素“中脲酶的利用率，應當采用酶的固定化技術．
故答案為：
（1）不能  培養基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源，不能選擇出只分解尿素為氮源的微生物
（2）①和②③
（3）稀釋涂布平板  菌落數目 
（4）酶的固定化

點評 本題以培養基成分的表格為載體，主要考查尿素分解菌的篩選與分離，意在強化學生對相關知識點的識記與理解．