Question

17．某一實驗小組的同學，欲通過制備固定化酵母細胞進行葡萄糖溶液發酵實驗，實驗材料及用具齊全．
（1）酵母細胞的固定采用的方法包埋法．
（2）該實驗小組的同學制備固定化酵母細胞的過程為：
A．使干酵母與蒸餾水混合并攪拌，使酵母菌活化
B．將無水CaCl₂溶解在自來水中配成CaCl₂溶液
C．用酒精燈大火連續加熱配制海藻酸鈉溶液
D．向剛溶化好的海藻酸鈉溶液中加入已活化的酵母細胞，充分攪拌并混合均勻
E．將與酵母混勻的海藻酸鈉液注入蒸餾水中，觀察凝膠珠形成
請你改正其中錯誤的操作（寫出4點）：
①配制CaCl₂溶液時應用蒸餾水．
②海藻酸鈉溶解應用小火或間斷加熱．
③海藻酸鈉溶液冷卻至常溫再加入酵母細胞．
④注射器中的海藻酸鈉和酵母細胞的混合物應滴入CaCl₂溶液．
（3）用固定化酵母細胞進行葡萄糖發酵時：
①加入葡萄糖液的濃度不能過高的原因是：可以防止酵母菌細胞過度失水死亡．
②為了使實驗中所用到的固定化酵母細胞可以反復運用，實驗過程一定要在無菌條件下進行．

Answer 1

分析 海藻酸鈉溶液固定酵母細胞的步驟：
1、酵母細胞的活化 
2、配制0.05mol/L的CaCl₂溶液 
3、配制海藻酸鈉溶液 （該實驗成敗的關鍵步驟） 
4、海藻酸鈉溶液與酵母細胞混合 
5、固定化酵母細胞
海藻酸鈉溶液固定酵母細胞的注意事項：
1、配制海藻酸鈉溶液：小火、間斷加熱、定容，如果加熱太快，海藻酸鈉會發生焦糊．
2、海藻酸鈉溶液與酶母細胞混合：冷卻后再混合，注意混合均勻，不要進入氣泡
3、制備固定化酵母細胞：高度適宜，并勻速滴入
4、剛溶化的海藻酸鈉應冷卻后再與酵母菌混合，否則溫度過高會導致酵母菌死亡．

解答 解：（1）酵母細胞的固定常用的方法是包埋法．
（2）①不能將無水CaCl₂溶解在自來水中，配制氯化鈣溶液時應用蒸餾水；    
②不能用酒精燈大火連續加熱配制海藻酸鈉溶液，否則可能發生焦糊，海藻酸鈉溶解應用小火或間斷加熱；
③海藻酸鈉溶液冷卻至常溫再加入酵母細胞，否則高溫會殺死細胞；
④注射器中的海藻酸鈉和酵母細胞的混合物應滴入氯化鈣溶液中，而非蒸餾水中．
（3）①加入反應液的濃度不能過高，否則濃度過高酵母細胞因失水過多而死亡．
②為了使實驗中所用到的固定化酵母細胞可以反復運用，實驗過程一定要在無菌條件下進行．
故答案為：
（1）包埋法 
（2）①配制CaCl₂溶液時應用蒸餾水    ②海藻酸鈉溶解應用小火或間斷加熱    ③海藻酸鈉溶液冷卻至常溫再加入酵母細胞    ④注射器中的海藻酸鈉和酵母細胞的混合物應滴入CaCl₂溶液
（3）①可以防止酵母菌細胞過度失水死亡  ②無菌

點評 本題考查細胞固定化技術的相關知識，意在考查學生的識記能力和判斷能力，運用所學知識綜合分析問題和解決問題的能力．