Question

下圖是培育表達人乳鐵蛋白的乳腺生物反應器的技術路線。圖中tet^R表示四環素抗性基因，amp^R表示氨芐青霉素抗性基因，BamHI、HindIII、SmaI指示線所示為三種限制酶的酶切位點。

據圖回答：
（1）圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體，需用           限制酶同時酶切載體和人乳鐵蛋白基因。篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含           的培養基上進行。
（2）能使人乳鐵蛋白基因在乳腺細胞中特異性表達的調控序列是      （填字母代號）。

A．啟動子

B．tetR

C．復制原點

D．ampR

（3）過程①可采用的操作方法是             。 
（4）對早期胚胎進行切割，經過程②可獲得多個新個體。這種技術實際上是一種      繁殖。
（5）為檢測人乳鐵蛋白是否成功表達，可采用               技術。

Answer 1

（1）HindⅢ和BamHⅠ；氨芐青霉素      （2）A    （3）顯微注射
（4）無性        （5）抗原—抗體雜交

解析試題分析：（1）據圖，僅將人乳鐵蛋白基因切割下來，需要在人乳鐵蛋白基因的左側用BamHⅠ切割，右側用HindⅢ切割。當人乳鐵蛋白基因和質粒連接成重組質粒后，tet^R基因被人乳鐵蛋白基因隔開，不是完整的，而amp^R基因是完整的，所以篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要含氨芐青霉素的培養基上進行。
（2）啟動子是基因表達調控的起始序列。
（3）目的基因導入動物細胞一般采用顯微注射法。
（4）胚胎分割屬于無性繁殖系。
（5）檢測目的基因是否表達一般用抗原—抗體雜交技術。
考點：基因工程
點評：本題著重考查了基因工程的限制酶的作用特點等知識，屬于對識記、理解層次的考查。