Question

16．為提高我國大豆的含鐵量，科研人員將菜豆的鐵結合蛋白基因導入了一個高產大豆品種中，獲得了高含鐵量轉基因大豆株系．如圖為培育過程，請分析并回答問題：

（1）獲取鐵結合蛋白基因用到的“手術刀”是限制性核酸內切酶，圖中②過程采用最多的方法是農桿菌轉化法．
（2）圖中的基因表達載體中，在鐵結合蛋白基因的首、尾兩端還應分別具有啟動子和終止子．
（3）基因表達載體中的標記基因的作用是為了鑒別檢測目的基因是否導入受體細胞中是否含有目的基因．檢測目的基因是否轉錄，應采用分子雜交技術技術．
（4）圖中①③過程須在無菌（自然/無菌）條件下進行，培養基中除加入必要的營養物質外，為促進細胞分裂、生長、分化，還需添加植物激素．
（5）過程④中秋水仙素作用是，在有絲分裂的前期，抑制紡錘體的形成，從而使單倍體植株染色體數目加倍，成為可育植株．

Answer 1

分析 分析圖解：該轉基因水稻的獲得過程為：首先獲取目的基因即鐵結合蛋白基因，然后構建基因表達載體；同時通過①花藥離體培養的方法獲得愈傷組織；并②將目的基因導入受體細胞，通過③再分化過程培養成為胚狀體，最后④利用秋水仙素使細胞的染色體數目加倍，繼而培養成轉基因植株，再進行目的基因的鑒定．

解答 解：（1）獲取重組載體用到的“手術刀”是限制性核酸內切酶．②過程是將目的基因導入受體細胞，由于水稻屬于雙子葉植物，通常用農桿菌轉化法將重組載體導入愈傷組織細胞．
（2）基因表達載體的組成包括啟動子、目的基因、標記基因和終止子等．
（3）重組載體中的標記基因的作用是檢測目的基因是否導入受體細胞．檢測目的基因是否轉錄，需用同位素標記的鐵結合蛋白基因作探針，即分子雜交的方法．
（4）圖中基因工程的操作以及植物的組織培養過程須在無菌條件下進行，培養基中除加入營養物質外，還需添加植物激素（生長素和細胞分裂素），作用是促進細胞分裂、生長、分化．
（5）秋水仙素的作用是抑制有絲分裂前期紡錘體的形成，進而導致細胞中的染色體數目加倍．
故答案為：
（1）限制性核酸內切酶　農桿菌轉化
（2）啟動子   終止子
（3）檢測目的基因是否導入受體細胞　分子雜交技術
（4）無菌　植物激素
（5）前    紡錘體

點評 本題綜合考查了基因工程、細胞工程等有關知識，要求考生能夠識記基因工程的操作工具、目的基因導入受體細胞的方法、目的基因檢測與鑒定的方法；明確秋水仙素作用的結果；識記植物組織培養過程中植物激素的作用等．