Question

9．我國糧產區產生的大量的作物秸稈，科技工作者研究出利用秸稈生產燃料酒精的技術，大致流程為（以玉米秸稈為例）：

（1）玉米秸稈預處理后，應該選用特定的酶進行水解，使之轉化為發酵所需的葡萄糖．從以下哪些微生物中可以提取到上述的酶？B
A．釀制果醋的醋酸菌      B．生長在腐木上的霉菌
C．制作酸奶的乳酸菌      D．生產味精的谷氨酸棒狀桿菌
（2）若要從土壤中分離生產這種酶的微生物，所需要的培養基為選擇培養基（按功能分），培養基中的碳源為纖維素．對培養基進行滅菌，應該采用的方法是高壓蒸汽滅菌法．
（3）某同學對這種微生物培養液進行數量測定，在稀釋倍數為10⁵對應的培養基中測得平板上菌落數的平均值為23.4，那么每毫升樣品中的菌落數是（涂布平板時所用稀釋液的體積為0.2mL）1.17×10⁷．
（4）用這種方法測定密度，實際活菌數量要比測得的菌落數量多，原因是當兩個或多個細胞連在一起時、繁殖成一個菌落，平板上觀察的是一個菌落．
（5）上述流程圖中，發酵階段需要的菌種是酵母菌，生產酒精要控制的必要條件是無氧（密封、密閉）．

Answer 1

分析 用植物秸稈生產酒精是利用微生物進行發酵的過程．
植物秸稈中的有機物主要是纖維素，纖維素分解菌產生的纖維素酶能將其水解成葡萄糖．
從土壤中分離纖維素分解菌的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養、梯度稀釋、涂布培養和篩選菌株．
篩選纖維素分解菌必須使用以纖維素為唯一碳源的選擇培養基，并且需要做產纖維素酶發酵葡萄糖的實驗進行酶活性的檢測．

解答 解：（1）生長在腐木上的霉菌、生長在落葉堆中的蘑菇及反芻動物瘤胃中生存的某些微生物中含有纖維素酶，故選：B．
（2）篩選目的微生物需要使用選擇培養基，培養基中的碳源為纖維素，培養基需要進行高壓蒸汽滅菌法滅菌．
（3）根據題意可知，每毫升樣品中的菌落數是23.4×10⁵÷0.2=1.17×10⁷．
（4）用稀釋涂布平板法進行微生物計數時，當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察的是一個菌落，所以實際活菌數量要比測得的菌落數量多．
（5）上述流程圖中，發酵階段需要的菌種是酵母菌，酵母菌無氧呼吸可以產生酒精，生產酒精要控制的必要條件是無氧（密封、密閉）．
故答案為：
（1）B
（2）選擇培養基    纖維素    高壓蒸汽滅菌法
（3）1.17×10⁷
（4）當兩個或多個細胞連在一起時、繁殖成一個菌落，平板上觀察的是一個菌落
（5）酵母菌       無氧（密封、密閉）

點評 本題主要考查纖維素分解菌的篩選和發酵產纖維素酶分解葡萄糖的實驗，意在強化學生對相關知識點的識記與理解．