Question

實驗表明，乙植物的耐旱能力很差．某研究機構計劃采用基因工程的方法，通過下圖所示的程序培育耐旱的乙植物新品種：

請據圖回答下列相關問題：
①通過PCR技術擴增耐旱基因時，需要Taq酶，該酶最大的特點是

 

．
②圖中使用的載體最可能是

 

．在構建基因表達載體時，耐旱基因應該插入到該載體的

 

中．
③圖中的載體上必須含有標記基因，以便檢測

 

細胞和

 

細胞中是否導入了

 

．
④B過程中，常用

 

處理使細菌轉化為感受態細胞，從而利于重組質粒的導入．D過程采用的方法是

 

．若把重組質粒導人動物細胞，常采用的方法是

 

．
⑤如果利用DNA分子雜交原理對再生植株進行檢測，應該用

 

作為探針．
⑥若要利用蛋白質工程繼續提高油料植物的出油率，其設計流程應從預期的

 

出發，設計預期的

 

結構，推測出應有的

 

序列，然后找到相對應的

 

序列，再用轉基因技術改變現有性狀．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術,植物培養的條件及過程

專題：

分析：分析題圖：圖示為培育耐旱的乙植物新品種的過程，其中A表示基因表達載體的構建過程；B表示將重組質粒導入農桿菌細胞；C表示用選擇培養基篩選出含有重組質粒的農桿菌；D表示用含有重組質粒的農桿菌干擾乙植物體細胞，進而將目的基因導入受體細胞；最后采用植物組織培養技術將轉基因細胞培育成轉基因植株．

解答： 解：①PCR技術需要在較高溫度條件下進行，因此需要耐高溫DNA聚合酶，即Taq酶．
②圖中將目的基因導入受體細胞的方法是農桿菌轉化法，因此使用的載體最可能是Ti質粒；農桿菌中的Ti質粒上的T-DNA可轉移至受體細胞，并且整合到受體細胞染色體的DNA上，因此在構建基因表達載體時，耐旱基因應該插入到該載體的T-DNA中．
③載體上必須含有標記基因，以便檢測農桿菌細胞和乙植物的愈傷組織細胞中是否導入了目的基因．
④B表示將表達載體導入農桿菌的過程，該過程中常用CaCl₂（或Ca²⁺） 處理細菌使之轉化為感受態細胞，從而利于重組質粒的導入．由圖可知，D過程采用的方法是農桿菌轉化法．將重組質粒導人動物細胞最有效的方法是顯微注射法．
⑤探針是指用放射性同位素（或熒光分子）標記的含有目的基因DNA片段．因此，本實驗中的探針是指放射性同位素標記的耐旱基因．
⑥蛋白質工程的設計流程：應從預期的蛋白質功能出發，設計預期的蛋白質結構，推測出應有的氨基酸序列，然后找到相對應的脫氧核苷酸序列，再用轉基因技術改變現有性狀．
故答案為：
①耐高溫
②Ti質粒    T-DNA
③農桿菌    乙植物的愈傷組織     目的基因
④CaCl₂（或Ca²⁺）     農桿菌轉化法    顯微注射法
⑤放射性同位素標記的耐旱基因
⑥蛋白質功能     蛋白質    氨基酸    脫氧核苷酸

點評：本題結合培育耐旱的乙植物新品種的過程圖解，考查基因工程和蛋白質工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理、工具及操作步驟，掌握各步驟中應注意的細節；識記蛋白質工程的概念及操作過程，能結合圖中信息答題．