Question

16．如圖為利用人成纖維細胞（具分裂能力、能在HAT培養基上存活）和小鼠骨髓瘤細胞（具分裂能力、不能在HAT培養基上存活）進行人類基因定位的操作示意圖，請回答相關問題．

（1）操作所用的成纖維細胞應傳代10代以內，誘導融合時需要加入的促融劑是PEG．
（2）人、鼠細胞先經過細胞膜融合形成多核或雙核細胞，再經過一次有絲分裂，形成單核細胞．HAT培養基起選擇培養作用，操作中加入烏本苷的目的是選出雜交瘤細胞．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示表示骨髓瘤細胞與成纖維細胞的融合過程，該技術的基礎是動物細胞培養技術．原生質體融合指通過人為的方法，使遺傳性狀不同的兩個細胞的原生質體進行融合，借以獲得兼有雙親遺傳性狀的穩定重組子的過程．據此解答．

解答 解：（1）操作所用的成纖維細胞應在10代以內，10代以內的細胞能保持正常的二倍體核型；可以采用物理（離心、振動）、化學（PEG）、生物誘導（滅活的病毒）融合方法．
（2）人、鼠細胞先經過細胞膜融合形成多核細胞，經過一次有絲分裂，形成單核細胞．據題干信息，人成纖維細胞能在HAT培養基上存活，而小鼠骨髓瘤細胞不能在HAT培養基上存活，則HAT培養基起選擇培養作用，篩選出人成纖維細胞和成纖維細胞融合的雜交細胞，操作中加人鳥本苷的目的是除去成纖維細胞，篩選出雜交細胞．
故答案為：
（1）10    PEG
（2）多核或雙核        有絲分裂      選擇      選出雜交瘤細胞

點評 本題結合圖解，考查動物細胞融合、動物細胞培養和培養基對微生物的選擇作用，要求考生識記動物細胞融合的概念及用途；識記動物細胞培養的條件；掌握培養基的種類及作用，能結合題中和圖中信息準確答題．