Question

4．反轉錄病毒載體是一種表達型質粒，結構如圖所示．圖上的“反轉錄病毒序列”可以整合到動物細胞的染色體上，不斷地表達其攜帶的目的基因．（E、F、H分別為限制酶E、F、H的酶切位點）．
（1）反轉錄的原料是（四種）脫氧核苷酸．
（2）在構建重組質粒時，目的基因應插入到該質粒的位置是F（或：反轉錄病毒序列），此過程需使用的酶是限制酶和DNA連接酶．為了篩選出含重組質粒的大腸桿菌，一般需要用添加抗生素A的培養基進行培養．獲取大量重組質粒后，將其再轉入到某種哺乳動物細胞中，可獲得大量重組反轉錄病毒．

Answer 1

分析 據圖分析，基因表達載體的構建是實施基因工程的第二步，也是基因工程的核心，基因工程載體的條件是能在受體細胞中保存并大量復制、有一至多了限制性內切酶切點和有特殊的遺傳標記基因，便于進行篩選．反轉錄酶序列中有限制酶F的切割位點，目的基因與運載體結合，在粘性末端堿基互補配對，需要DNA連接酶作用于磷酸二酯鍵，形成重組DNA分子；該質粒上有具有的遺傳標記基因是抗生素A抗性基因，可以用加有抗生素A的選擇培養基進行篩選．

解答 解：（1）逆轉錄是以RNA為模板合成DNA的過程，所需要的模板為RNA，原料為四種脫氧核苷酸．
（2）基因工程需要工具酶是限制酶和DNA連接酶；用到的限制酶不能破壞標記基因（抗生素A抗性基因），且應該整合到“逆轉錄病毒序列”上；抗生素A抗性基因為標記基因，用來幫助篩選目的基因．
故答案為：
（1）（四種）脫氧核苷酸       
（2）F（或反轉錄病毒序列）　   限制酶和DNA連接酶　    抗生素A

點評 本題考查RNA復制，逆轉錄需要的模板、原料，重組質粒時目的基因的插入位點的知識，意在考查學生識圖能力、信息的提取與應用能力、通過比較與綜合做出合理判斷的能力等．