Question

1．在生物的生長發育過程中，基因是選擇性表達的．某真核生物，要想獲得極為稀少的mRNA及其克隆，可以用如圖所示的差異雜交法．Poly（A）是指位于mRNA上的150-200個腺苷酸殘基．請回答下列問題．
（1）利用表達目的mRNA的細胞獲得放射性標志的探針時，需要用逆轉錄酶酶，可以用Poly（A）作為引物．
（2）用羥基磷灰石柱層析法，回收未雜交的³²P標記的單鏈DNA（填“未雜交的³²P標記的單鏈DNA”或“雜交分子”），用構建cDNA（填“基因組”或“cDNA”）文庫．
（3）在生物的生長發育過程中．由于基因選擇性表達導致細胞分化，該過程的結果使多細胞生物體中的細胞趨向專門化，有利于提高各種生理功能的效率．
（4）若用NaOH水解除去mRNA獲得的分子與不表達目的mRNA細胞中獲得的單鏈DNA雜交，可能形成雜合雙鏈區和游離的單鏈區，原因是DNA分子中含有內含子、非編碼區等序列，mRNA分子中沒有互補的堿基序列，仍然為兩條游離的單鏈，所以出現游離單鏈區．DNA分子中含有外顯子序列，mRNA中具有互補的堿基序列，互補堿基序列就會結合在一起，形成雜合雙鏈區．

Answer 1

分析 分析圖解可知，圖中a表示轉錄形成mRNA，b表示逆轉錄形成DNA單鏈，c過程表示去除Poly（A），剩余的DNA片段作為探針，并和不表達目的mRNA的細胞中表達的基因中的mRNA雜交，從而獲得表達的基因的單鏈DNA．

解答 解：（1）分析圖解可知，利用表達目的mRNA的細胞獲得放射性標志的探針的過程就是逆轉錄過程，因此需要用逆轉錄酶，用Poly（A）作為引物．
（2）根據題意可知“要想獲得極為稀少的mRNA及其克隆”，因此用羥基磷灰石柱層析法，回收未雜交的³²P標記的單鏈DNA，由于該DNA是利用mRNA逆轉錄而來，不包含這種生物的全部基因，因此構建的是cDNA文庫．
（3）在生物的生長發育過程中，由于基因選擇性表達導致細胞分化，該過程的結果使多細胞生物體中的細胞趨向專門化，有利于提高各種生理功能的效率．
（4）DNA分子中含有內含子、非編碼區等序列，mRNA分子中沒有互補的堿基序列，仍然為兩條游離的單鏈，所以出現游離單鏈區．DNA分子中含有外顯子序列，mRNA中具有互補的堿基序列，互補堿基序列就會結合在一起，形成雜合雙鏈區，因此用NaOH水解除去mRNA獲得的分子與不表達目的mRNA細胞中獲得的單鏈DNA雜交，可能形成雜合雙鏈區和游離的單鏈區．
故答案為：
（1）逆轉錄酶    Poly （A）    
（2）未雜交的³²P標記的單鏈DNA     cDNA
（3）分化    專門化
（4）DNA分子中含有內含子、非編碼區等序列，mRNA分子中沒有互補的堿基序列，仍然為兩條游離的單鏈，所以出現游離單鏈區．DNA分子中含有外顯子序列，mRNA中具有互補的堿基序列，互補堿基序列就會結合在一起，形成雜合雙鏈區

點評 本題屬于信息題，考查了遺傳信息的表達和基因文庫構建的有關知識，要求考生能夠通過圖示分析理解部分基因文庫獲得的原理，能夠區分通過反轉錄法合成的目的基因和細胞中原有基因的區別，區分基因組文庫和部分基因文庫，再結合題干信息答題，具有一定的難度．