Question

人和哺乳動物的尿中含有尿素，大量尿素的存在會對環境造成污染．土壤中有些細菌含有脲酶，可通過降解尿素作為其生長的氮源．現對土壤中的這類細菌進行分離實驗，請回答下列問題：
（1）分離培養細菌時必須進行無菌操作，包括培養基和各種器皿都必須是無菌的，常用的滅菌方法有

 

、

 

和

 

．
（2）將樣液進行一系列的梯度稀釋，然后接種培養．在稀釋土壤溶液的過程中每一步都要在

 

旁進行操作．接種后的培養皿倒置于37℃的

 

中培養．
（3）用含有酚紅指示劑的培養基篩選能分泌脲酶的細菌，從功能上劃分該培養基屬于

 

培養基．若培養基中存在有分解尿素的細菌，其菌落周圍會出現紅色環帶，這是由于尿素被分解產生的

 

使pH升高，酚紅指示劑產生的顏色變化，從而證明這一菌株可以尿素為氮源．變色區域越大，表明該菌株利用尿素的能力

 

．

Answer 1

考點：微生物的分離和培養,培養基對微生物的選擇作用

專題：

分析：尿素分解菌廣泛存在與土壤，其可以產生脲酶使尿素被分解成氨可使PH呈堿性，從而使添加酚紅指示劑的鑒別培養基上的菌落周圍會出現紅色環帶．分離尿素分解菌時常用的滅菌方法有高壓蒸汽滅菌，灼燒滅菌，干熱滅菌．在實驗操作過程中，為防止雜菌污染操作要在酒精燈火焰旁操作，接種后的培養皿倒置于37℃的恒溫培養箱中培養．

解答： 解：（1）常用的滅菌方法有高壓蒸汽滅菌，灼燒滅菌，干熱滅菌．
（2）為避免雜菌污染，操作要在酒精燈火焰旁操作，為防止水蒸氣在皿蓋上凝結會產生水滴，在恒溫培養箱中培養皿需要倒置培養．
（3）酚紅指示劑可用于鑒定尿素分解菌，故培養基為鑒別培養基；尿素被分解成氨可使PH呈堿性，變色區域越大，說明分解能力越強；以尿素為氮源的培養基中菌落數少，因為其他微生物不能在該環境中生存．
故答案為：
（1）高壓蒸汽滅菌   灼燒滅菌   干熱滅菌
（2）酒精燈火焰旁   恒溫箱
（3）鑒別   氨    越強

點評：本題主要考查尿素分解菌的分離及微生物的滅菌方法等知識點，意在加強學生實驗的無菌操作意識，提高實驗技能．