Question

7．（1）基因工程的核心步驟是基因表達載體的構建．
（2）進行動物細胞培養時，CO₂的主要作用是維持培養液的PH．

Answer 1

分析 1、基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等
2、動物細胞培養的條件：
（1）無菌、無毒的環境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養液，以清除代謝廢物．
（2）營養物質：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質．
（3）溫度和PH．
（4）氣體環境：95%空氣（細胞代謝必需的）和5%的CO₂（維持培養液的PH）．

解答 解：（1）基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲取；②基因表達載體的構建；③將目的基因導入受體細胞；④目的基因的檢測與表達．其中，基因表達載體的構建是基因工程的核心步驟．
（2）進行動物細胞培養時，應在含CO₂的恒溫培養箱中進行，CO₂的作用是維持培養液pH．
故答案為：
（1）基因表達載體的構建
（2）維持培養液的PH

點評 本題比較基礎，考查基因工程的原理及技術和動物細胞培養的相關知識，只要考生識記基因工程的操作步驟和動物細胞培養的條件即可正確答題，屬于考綱識記層次的考查．