Question

【題目】生物興趣小組以甜菜嫩葉為材料提取DNA，主要實驗步驟如下，其中氯仿-異戊醇不溶于水，且密度均大于水。請分析回答：

（1）圖1以甜菜嫩葉為材料，每毫克組織所提取的DNA量較高，原因是_____________。

（2）圖1步驟①中甜菜組織研磨前先經液氮冷凍處理的主要優點是_________________。在常溫條件下，也可向切碎的組織材料中加入一定量的____________________，再進行充分攪拌和研磨。

（3）圖1步驟③將DNA粗提液在65℃水浴保溫60min的目的是___________________。步驟④加氯仿-異戊醇，離心后取上清液的原理是_______________________________。

（4）根據圖1操作步驟可知，影響DNA純度的物質主要有____________________和小分子物質等。

（5）電泳可以直觀對比DNA的完整性，分子大小不同的DNA在凝膠上遷移速率不同，從而產生不同的條帶。圖2是利用三種不同的方法提取到的甜菜嫩葉總DNA凝膠電泳結果，其中M是已知大小的不同DNA的混合物。實驗結果顯示A、B方法提取的總DNA電泳結果只有一條帶，而C方法有明顯的“拖尾”現象。出現“拖尾”現象的原因是________________________________________________。

Answer 1

【答案】嫩葉細胞分裂旺盛 充分破碎植物細胞，使研磨充分 洗滌劑和食鹽 使蛋白質變性 DNA不溶于氯仿-異戊醇，蛋白質等溶于氯仿-異戊醇 蛋白質、RNA DNA發生斷裂或降解，形成許多大小不等的DNA片段

【解析】

DNA粗提取和鑒定的原理：

1、DNA的溶解性：DNA和蛋白質等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但細胞中的某些蛋白質溶于酒精；DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性。

2、DNA的鑒定：在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會被染成藍色。

（1）圖1以甜菜嫩葉為材料，嫩葉細胞分裂旺盛，每毫克組織所提取的DNA量較高。

（2）圖1步驟①中甜菜組織研磨前先經液氮冷凍處理的主要優點是充分破碎植物細胞，使研磨充分。在常溫條件下，也可向切碎的組織材料中加入一定量的洗滌劑和食鹽，再進行充分攪拌和研磨。

（3）將DNA粗提液在65℃水浴保溫60min的目的是使蛋白質變性。步驟④加氯仿-異戊醇，離心后取上清液的原理是DNA不溶于氯仿-異戊醇，蛋白質等溶于氯仿-異戊醇。

（4）根據圖1操作步驟可知，影響DNA純度的物質主要有蛋白質、RNA和小分子物質等。

（5）DNA分子在進行凝膠電泳時，由于DNA發生斷裂或降解，形成許多大小不等的DNA片段，因此會出現“拖尾”現象。