Question

人和哺乳動物的尿中含有尿素，大量尿素的存在會對環境造成污染．土壤中有些細菌含有脲酶，可通過降解尿素作為其生長的氮源．現對土壤中的這類細菌進行分離實驗，請回答下列問題：
（1）分離培養細菌時必須進行無菌操作，包括

 

和各種器皿都必須是無菌的，常用的滅菌方法有

 

（答2種）．
（2）采用

 

法將樣液進行一系列的梯度稀釋，然后接種培養．在稀釋土壤溶液的過程中每一步都要在

 

旁進行操作．接種后的培養皿

 

于37℃的恒溫箱中培養．
（3）用

 

培養基篩選能分泌脲酶的細菌，從功能上劃分該培養基屬于

 

培養基．若培養基中存在有脲酶的細菌，其菌落周圍會出現紅色環帶，這是由于尿素被分解產生的

 

，遇培養基中加入的酚紅指示劑產生的顏色變化，從而證明這一菌株可以尿素為氮源．變色區域越大，表明該菌株利用尿素的能力

 

．
（4）與全營養培養基中的菌落相比，以尿素為氮源的培養基中菌落數

 

．
A．多     B．少    C．相等     D．幾乎為零．

Answer 1

考點：微生物的分離和培養,以尿素為氮源，測定能生長的細菌的數量

專題：

分析：實驗室常用的滅菌方法有灼燒滅菌（如接種環）、干熱滅菌（如培養皿）、高壓蒸汽滅菌（如培養基）等．無菌操作要求在整個實驗過程中操作都在酒精燈火焰附近進行，以避免周圍微生物的污染．微生物接種的方法很多，最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法．稀釋涂布平板法則是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養基的表面，進行培養．

解答： 解：（1）用于微生物培養的器皿、接種工具和培養基等都必須是無菌的；常用的滅菌方法有高壓蒸汽滅菌、灼燒滅菌和干熱滅菌．
（2）采用稀釋涂布平板法將樣液進行一系列的梯度稀釋，然后接種培養；為避免雜菌污染，操作要在酒精燈火焰旁操作，為防止水蒸氣在皿蓋上凝結會產生水滴，培養皿需要倒置在恒溫培養箱中培養．
（3）酚紅指示劑可用于鑒別微生物，所以含有酚紅指示劑的培養基屬于鑒別培養基；尿素被分解成氨可使PH呈堿性，變色區域越大，說明其分解能力越強．
（4）以尿素為氮源的培養基中菌落數少，因為其他微生物不能在該環境中生存．
故答案為：
（1）接種工具和培養基   高壓蒸汽滅菌、灼燒滅菌、干熱滅菌
（2）稀釋涂布平板法    酒精燈火焰旁   倒置 
（3）鑒別     氨      越強
（4）B

點評：本題以脲酶為素材，考查微生物的分離和培養、以氮素為氮源測定能生長的細菌的數量，要求考生識記無菌技術，特別是實驗室常用的消毒和滅菌方法；掌握培養基的種類，能應用相應的培養基對土壤中的含有脲酶的細菌進行分離．