Question

18．作物育種研究中常用農桿菌轉化法將含抗蟲基因的Ti質粒導入到植物體細胞中，再利用植物組織培養技術獲得抗蟲的農作物，下列關于該法的敘述正確的是（　　）

• A． 構建重組的Ti質粒需要限制酶和DNA聚合酶參與
• B． 農桿菌侵染植物細胞后，重組Ti質粒會全部整合到植物的染色體上
• C． 若檢測到轉基因植株的染色體上含抗蟲基因，該植株一定會表現出抗蟲性狀
• D． 轉基因植株是否能表現出抗蟲性狀是檢驗轉基因成功與否的標志

Answer 1

分析 1、基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．
2、農桿菌轉化法的原理：農桿菌中的Ti質粒上的T-DNA可轉移至受體細胞，并且整合到受體細胞染色體的DNA上．根據農桿菌的這一特點，如果將目的基因插入到Ti質粒的T-DNA上，通過農桿菌的轉化作用，就可以把目的基因整合到植物細胞中染色體的DNA上．

解答 解：A、構建重組的Ti質粒需要限制酶和DNA連接酶參與，A錯誤；
B、農桿菌侵染植物細胞后，重組Ti質粒的T-DNA會整合到植物的染色體上，而不是全部Ti質粒都整合到染色體上，B錯誤；
C、若檢測到轉基因植株的染色體上含抗蟲基因，這表明目的基因已經導入受體細胞，但該植株不一定會表現出抗蟲性狀，因為目的基因不一定能成功表達，C錯誤；
D、轉基因植株是否能表現出抗蟲性狀是檢驗轉基因成功與否的標志，D正確．
故選：D．

點評 本題考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節問題，能結合所學的知識準確判斷各選項．