Question

4．家蠶細胞具有高效表達外源基因的能力．將人干擾素基因導入家蠶細胞并大規模培養，可以提取干擾素用于制藥．
（1）進行轉基因操作前，需用胰蛋白酶短時間處理幼蠶組織，以便獲得單個細胞．
（2）為使干擾素基因在家蠶細胞中高效表達，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入表達載體的啟動子和終止子之間；若要檢測干擾素基因在家蠶細胞中是否表達，可以采用的方法是分子雜交、抗原-抗體結合．
（3）通過PCR技術可大量獲取目的基因．PCR反應體系主要包括：擴增緩沖液（含Mg²⁺）、水、4種脫氧核糖核苷酸、模板DNA、耐高溫的DNA聚合酶（taq酶）和與干擾素基因特異性配對的DNA引物．
（4）培養家蠶細胞時，貼壁生長的細胞會產生接觸抑制．通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應器中，這樣可以增大表面積，增加培養的細胞數量，也有利于空氣交換．
（5）“桑基魚塘”生態系統能充分利用廢棄物中的能量，形成“無廢棄物農業”，這主要是遵循生態工程的物質循環再生原理．同時，通過飼養家禽、家畜，栽培食用菌，提高農民經濟收入，使保護環境和發展經濟相互協調，這又體現了生態工程的整體性原理．

Answer 1

分析 1、基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲取；②基因表達載體的構建；③將目的基因導入受體細胞；④目的基因的檢測與表達．從分子水平上檢測目的基因的方法：（1）分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．
2、PCR技術的條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩定DNA聚合酶（Taq酶）等．
3、生態工程原理：
（1）物質循環再生原理：物質能在生態系統中循環往復，分層分級利用；
（2）物種多樣性原理：物種繁多復雜的生態系統具有較高的抵抗力穩定性；
（3）協調與平衡原理：生態系統的生物數量不能超過環境承載力（環境容納量）的限度；
（4）整體性原理：生態系統建設要考慮自然、經濟、社會的整體影響；
（5）系統學和工程學原理：系統的結構決定功能原理：要通過改善和優化系統結構改善功能；
系統整體性原理：系統各組分間要有適當的比例關系，使得能量、物質、信息等的轉換和流通順利完成，并實現總體功能大于各部分之和的效果，即“1+1＞2”．

解答 解：（1）動物細胞培養時，需要用胰蛋白酶處理動物組織，以便獲得單個細胞．
（2）基因表達載體包括啟動子、終止子、目的基因和標記基因，其中啟動子位于目的基因的首端，終止子位于目的基因的尾端．基因表達包括轉錄和翻譯兩個步驟，要檢測目的基因是否轉錄，可采用分子雜交技術，要檢測目的基因是否翻譯，可采用抗原-抗體雜交法．
（3）采用PCR技術大量擴增目的基因時，其體系主要包括：擴增緩沖液（含Mg²⁺）、水，4種脫氧核糖苷酸、模板DNA、耐高溫的DNA聚合酶（taq酶）和DNA引物．
（4）培養家蠶細胞時，貼壁生長的細胞會產生接觸抑制．通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應器中，這樣可以增大表面積，增加培養的細胞數量，也有利于空氣交換．
（5）“桑基魚塘”生態系統能充分利用廢棄物中的能量，形成“無廢棄物農業”，這主要是遵循生態工程的物質循環再生原理．同時，通過飼養家禽、家畜，栽培食用菌，提高農民經濟收入，使保護環境和發展經濟相互協調，這又體現了生態工程的整體性原理．
故答案為：
（1）胰蛋白
（2）啟動子    終止子     分子雜交、抗原-抗體結合
（3）耐高溫的DNA聚合酶（taq酶）  
（4）增大表面積
（5）物質循環再生    整體性

點評 本題綜合考查基因工程、動物細胞培養、生態工程原理等知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟；識記動物細胞培養的具體過程；掌握生態工程的原理及一般實例，能結合所學的知識準確答題．