Question

10．上海醫學遺傳研究所成功培育出第一頭攜帶人白蛋白基因的轉基因牛．他們還研究出一種可大大提高基因表達水平的新方法，使轉基因動物乳汁中的藥物蛋白含量提高了30多倍，標志著我國轉基因研究向產業化的目標又邁進了一大步．回答下列與基因工程相關的問題：
（1）人白蛋白基因可以從基因文庫中獲取，用到的工具酶是：限制酶
（2）之后需要進行構建基因表達載體，此步驟是基因工程的核心．限制酶MunⅠ和限制酶EcoRⅠ的識別序列及切割位點分別是-C↓AATTG-和-G↓AATTC-．如圖表示四種質粒和目的基因，其中，箭頭所指部位為酶的識別位點，質粒的陰影部分表示標記基因．適于作為圖示目的基因運載體的是A．

（3）提高“基因表達水平”的意思是：提高轉基因動物乳汁中人白蛋白的含量．為檢測人白蛋白是否成功表達，可采用③（填序號）技術．
①核酸分子雜交　②基因序列分析　 ③抗原-抗體雜交　④PCR
（4）若想獲得多個新個體，可在早期培養過程中用胚胎分割 技術處理胚胎就行．

Answer 1

分析 基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）基因工程中獲取目的基因需要用到限制酶．
（2）A、用限制酶MumⅠ切割該質粒后，不會破壞標記基因，而且還能產生與目的基因兩側黏性末端相同的末端，適于作為目的基因的運載體，A正確；
B、該質粒沒有標記基因，不適于作為目的基因的運載體，B錯誤；
C、該質粒含有標記基因，但用限制酶切割后會被破壞，因此不適于作為目的基因的運載體，C錯誤；
D、該質粒含有標記基因，但用限制酶切割后會被破壞，因此不適于作為目的基因的運載體，D錯誤．
故選：A．
（3）基因工程的目的基因是人白蛋白基因，其表達產物是人白蛋白．檢測白蛋白是否成功表達，可以用抗原抗體雜交法．
（4）在早期培養過程中用胚胎分割技術處理胚胎，可以獲得多個遺傳性狀相同的新個體．
故答案為：
（1）限制酶        
（2）A
（3）乳汁中人白蛋白的含量       ③
（4）胚胎分割

點評 本題考查基因工程的原理及技術，要求考生識記基因工程的原理、基因工程的操作工具及操作步驟，掌握各操作步驟中的相關細節，能結合所學的知識準確判斷各選項，屬于考綱識記和理解層次的考查．