Question

14．尿素是一種重要的農業肥料，經微生物分解后能更好的被植物利用．某生物興趣小組試圖探究土壤中微生物對尿素是否有分解作用，設計實驗并成功篩選到能高效分解尿素的細菌（目的菌）．培養基成分如下表所示．

KH2PO4	NaHPO4	MgSO4•7H2O	葡萄糖	尿素	瓊脂
1.4g	2.1g	0.2g	10g	lg	15g

將表中物質溶解后，用蒸餾水定容到100mL．實驗過程如圖所示：
回答下列問題：
（1）該培養基能篩選出目的菌的原因是該選擇培養基中的唯一氮源是尿素．
（2）圖中將細菌轉到固體培養基上接種時，可采用的方法是稀釋涂布平板法．初步篩選出來的菌種還需要進一步的鑒定：在培養基中加入酚紅指示劑，接種并培養初步篩選的菌種，若指示劑變成紅色，則可說明該菌種能夠分解尿素．
（3）在實驗中，下列材料或用具需要滅菌的是①②，需要消毒的是③（填序號）．
①培養細菌的培養基與培養皿
②玻棒、試管、錐形瓶和吸管
③實驗操作者的雙手
（4）在進行分離分解尿素的細菌實驗時，A同學從培養基上篩選出大約50個菌落，而其他同學只選擇出大約20個菌落．A同學的實驗結果產生的原因可能有①②③（填序號）．
①所取土樣不同 ②培養基被污染 ③接種操作錯誤 ④沒有設置對照實驗
（5）實驗結束后，使用過的培養基應該進行滅菌處理后，才能倒掉．

Answer 1

分析 從土壤中分離微生物的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養、梯度稀釋、涂布培養和篩選菌株．選擇培養基的目的是篩選目的菌，在固體培養基上接種的方法通常是稀釋涂布平板法和平板劃線法．接種過程中培養基、接種器具要滅菌，操作者的雙手和環境要消毒．

解答 解：（1）選擇培養基的是指在培養基上加入某種化學試劑，以抑制不需要微生物的生長，促進所需要微生物的生長．該培養基中加入尿素的目的是篩選出能分解尿素的細菌．
（2）轉為固體培養時常用的接種方法是涂布平板法或平板劃線法．尿素分解菌可以用酚紅指示劑進行鑒定，原因是其體內產生的脲酶能夠將尿素轉化為氨是酚紅指示劑呈紅色．
（3）培養細菌用的培養基與培養皿，玻棒、試管、錐形瓶和吸管需要進行滅菌處理；實驗操作者的雙手需要進行消毒．
（4）該同學與其他同學獲得的菌落數差異很大，可能的原因是采用的土樣不同，培養基滅菌不徹底，培養基被污染；或者是實驗過程中沒有進行無菌操作．故選：①②③．
（5）為避免污染環境與操作者，使用過的培養基應該進行滅菌處理后才能倒掉．
故答案為：
（1）該選擇培養基中的唯一氮源是尿素
（2）稀釋涂布平板法   酚紅   紅
（3）①②③
（4）①②③
（5）滅菌

點評 對于微生物培養技術、選擇培養基的選擇作用、培養基為微生物提供的營養成分、常用的接種方法和具體操作過程的理解把握知識點間的內在聯系是解題的關鍵．